細(xì)胞名稱: Caco-2 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
貼壁,,上皮樣細(xì)胞
編號(hào): 350769
產(chǎn)品形式: 2mL 凍存管× 2 支,、或T25 × 1 瓶;
安全等級(jí): 一級(jí),,安全柜或超凈臺(tái)操作
收貨須知:收貨當(dāng)天發(fā)現(xiàn)異常,,請(qǐng)?jiān)?4 小時(shí)內(nèi)及時(shí)聯(lián)系客服,逾期視為收貨良好,;凍存管形式,,收貨后及時(shí)置于-80℃冰箱保存,若長(zhǎng)時(shí)間不使用,,應(yīng)過(guò)夜轉(zhuǎn)移至液氮保藏,;T25 形式,收貨后先培養(yǎng)瓶原裝置于培養(yǎng)箱靜養(yǎng)4h,,然后再對(duì)細(xì)胞進(jìn)行常規(guī)操作,。復(fù)蘇時(shí)每管一次用完不得留存,復(fù)蘇后傳一代,,即可正常使用,。請(qǐng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明操作,否則造成細(xì)胞失活等情形,,不予提供補(bǔ)發(fā)服務(wù),。
培養(yǎng)條件:37℃,5%CO2,,CM1-1 培養(yǎng)液,。CM1-1 培養(yǎng)液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM 高糖培養(yǎng)液,,含谷氨酰胺,,含丙酮酸鈉,。
復(fù)蘇步驟:①新制100mm 平皿1 個(gè),含12mL 上述培養(yǎng)液,;②凍存管從液氮或-80℃中取出,,37℃水浴1~2min,待*溶解后盡快移入安全柜復(fù)蘇;③用無(wú)菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,,順時(shí)針搖勻,;④放入(37℃,5%CO2)培養(yǎng)箱中,,過(guò)夜換液,,2-4 天長(zhǎng)滿。
傳代/凍存:將舊培養(yǎng)液吸除,,PBS 清洗兩遍后,,加入6mL(/100mm 皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,,期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,,細(xì)胞剛有脫落時(shí),則吸除大部分胰酶,,留約0.5mL,,移至培養(yǎng)箱消化,約5min 取出,。傳代用12mL CM1-1 培養(yǎng)液終止消化,,輕輕吹打均勻細(xì)胞,后可分3~6 皿培養(yǎng),;凍存則用6mL 凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,,吹打均勻,分為6 支凍存管,,用程序降溫盒于-80℃凍存,。
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