細(xì)胞名稱： Caco-2 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
貼壁，上皮樣細(xì)胞
編號： 350769
產(chǎn)品形式： 2mL 凍存管× 2 支,、或T25 × 1 瓶,；
安全等級： 一級，安全柜或超凈臺操作
收貨須知：收貨當(dāng)天發(fā)現(xiàn)異常,，請在24 小時內(nèi)及時聯(lián)系客服,，逾期視為收貨良好；凍存管形式,，收貨后及時置于-80℃冰箱保存,，若長時間不使用，應(yīng)過夜轉(zhuǎn)移至液氮保藏,；T25 形式,，收貨后先培養(yǎng)瓶原裝置于培養(yǎng)箱靜養(yǎng)4h，然后再對細(xì)胞進(jìn)行常規(guī)操作,。復(fù)蘇時每管一次用完不得留存,，復(fù)蘇后傳一代，即可正常使用,。請嚴(yán)格按照本說明操作,，否則造成細(xì)胞失活等情形，不予提供補(bǔ)發(fā)服務(wù),。
培養(yǎng)條件：37℃,，5%CO2，CM1-1 培養(yǎng)液,。CM1-1 培養(yǎng)液：90%DMEM-H+10%FBS,。DMEM-H：DMEM 高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺,，含丙酮酸鈉,。
復(fù)蘇步驟：①新制100mm 平皿1 個，含12mL 上述培養(yǎng)液,；②凍存管從液氮或-80℃中取出,，37℃水浴1~2min,待*溶解后盡快移入安全柜復(fù)蘇；③用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,，順時針搖勻,；④放入（37℃，5%CO2）培養(yǎng)箱中,，過夜換液,，2-4 天長滿。
傳代/凍存：將舊培養(yǎng)液吸除,，PBS 清洗兩遍后,，加入6mL（/100mm 皿）胰酶,，在顯微鏡下觀察,，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,，細(xì)胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶,，留約0.5mL,，移至培養(yǎng)箱消化，約5min 取出,。傳代用12mL CM1-1 培養(yǎng)液終止消化,，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可分3~6 皿培養(yǎng),；凍存則用6mL 凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化,，吹打均勻，分為6 支凍存管,，用程序降溫盒于-80℃凍存,。
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