01、概述
伏馬菌素 (Fumonisin FB) 是一種霉菌毒素,，是由串珠鐮刀菌（Fusarium moniliforme Sheld）產(chǎn)生的水溶性代謝產(chǎn)物,，是一類由不同的多氫醇和丙三羧酸組成的結(jié)構(gòu)類似的雙酯化合物。伏馬菌素主要污染糧食及其制品,，并對某些家畜產(chǎn)生急性毒性及潛在的致癌性,，有報(bào)道指出，伏馬菌素主要損害肝腎功能,，能引起馬腦白質(zhì)軟化癥和豬肺水腫等,，并與我國和南非部分地區(qū)高發(fā)的食道癌有關(guān)，現(xiàn)已引起世界范圍的廣泛注意,。已成為繼黃曲霉毒素之后的又一研究熱點(diǎn),。
月旭科技新推出伏馬毒素（B1/B2/B3）免疫親和柱，適合于和HPLC或LC-MS結(jié)合使用,，定量檢測FB1,、FB2和FB3。適用于糧谷,、飼料等樣本中的伏馬毒素凈化處理,，提高了樣品的純度，純化后的提取液可用于不同的分析方法測定,。
02,、原理
凈化的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，伏馬毒素單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠介質(zhì)上，樣品中的伏馬毒素經(jīng)過提取,、過濾,、稀釋，然后將樣品提取液緩慢通過伏馬毒素免疫親和柱,，在免疫親和柱內(nèi),，伏馬毒素與抗體結(jié)合，洗滌液通過免疫親和柱除去未被結(jié)合的雜質(zhì),。最后采用甲醇-乙酸洗脫伏馬毒素,，然后進(jìn)行相關(guān)分析。
03,、凈化步驟
1）準(zhǔn)確稱取20g（精確至0.01g）粉碎的樣品,；
2）先加入50mL樣品提取液混合，搖床振蕩提取30min,，于4000r/min,，離心5min，取出上清液于試劑瓶中,；
3）將底部沉淀部分再加入50mL樣品提取液混合,，以搖床振蕩提取30min，于4000r/min,，離心5min,，取出上清液，與前面的上清液合并混勻,；
4）準(zhǔn)確移取10mL上清液,，加入40mL 1.5%吐溫20-PBS稀釋，用玻璃微纖維濾紙過濾,，至濾液澄清,，備用。
5）準(zhǔn)確移取15mL混勻?yàn)V液（相當(dāng)于0.6g樣品）過親和柱,。
6）3mL柱管上方堵頭直接連接20mL針筒固定后使用（柱管內(nèi)偶見有小氣泡屬正?，F(xiàn)象，不影響親和柱的使用）,；
7）準(zhǔn)確移取上述混勻?yàn)V液,，注入注射器中，調(diào)節(jié)針筒壓力使其以2秒/滴的速度緩慢通過免疫親和柱,；
8）先用10mL PBS沖洗柱子,，再用3mL水沖洗柱子，棄去流出液,，流速1秒/滴,，直至2~3mL空氣通過柱體,，保證柱子內(nèi)沒有殘余液體；
9）準(zhǔn)確加入3.0mL洗脫液洗脫,，流速自然重力,，直至2~3mL空氣通過柱體，保證柱子內(nèi)沒有殘余液體,。收集全部洗脫液,，進(jìn)行相關(guān)測定。
（注意：整個純化過程盡量不要讓柱子干燥?。?/strong>
04,、色譜條件
流動相配置
流動相A ：移取0.2mL 甲酸，加水至200mL混勻,，經(jīng)0.22μm濾膜抽濾,，即得；
流動相B：分別移取200mL色譜級乙腈和甲醇,，混勻,，經(jīng)0.22μm濾膜抽濾，即得,。
質(zhì)譜條件
離子源：ESI,；
檢測方式：MRM；
干燥氣：氮?dú)猓?50℃,；
流速：1000L/Hr,；
碰撞氣：氬氣；
離子噴霧電壓：1.0kV,。
05、譜圖展示
06,、結(jié)果展示
【 產(chǎn)品信息 】
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
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