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色譜柱傷不起,！關于液相色譜柱使用的6大注意事項
喜愛養(yǎng)花的人都知道,，不同的花卉有不同的特性，對光照,、水分,、溫濕度的需求都不相同。要了解這些,，才能使花草處于健康的狀態(tài),，時不時為你鮮花綻放。反之,，不了解這些,，花草就處于不健康狀態(tài)，不僅不開花,，還會把花養(yǎng)死,。
那么，液相色譜柱做為比較昂貴的色譜耗材,，也具有很多特性,，如果不了解這些注意事項，一不留神就會用壞,。
關于液相色譜柱的使用注意事項,，
一般有以下幾點：
01 過濾流動相和樣品
流動相通常由水或緩沖溶液與有機溶劑混合而成。原則上,，所有經(jīng)過色譜柱的流動相均應過濾,，但在實際操作上應視具體情況而有所區(qū)別：當有機溶劑用色譜純級，水用石英亞沸水或其它超純水時,，在能確保水和有機溶劑的質(zhì)量且沒有受到污染時,，過濾并無更多實際意義。
當流動相中含有緩沖鹽時,，則過濾是必要的,，如前所述，當緩沖溶液放置一段時間,，在使用前還應重新過濾（含有緩沖鹽的流動相,，長菌較快,，建議現(xiàn)用現(xiàn)配）。
所配制的樣品試液在注入流路系統(tǒng)前均要經(jīng)0.45μm(0.22μm則更好)孔徑濾膜過濾,。要注意區(qū)分水系和油系,，二者不可混用，以防止濾膜溶解而造成污染,。
裝流動相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線濾器要定期清洗和更換,，以避免濾器因過載而起不到過濾作用。
02 凈化樣品
當樣品中含有對色譜柱有損害的化學成分,，如產(chǎn)生永jiu性吸附的蛋白質(zhì),、糖等有機分子和強吸附性物質(zhì)，以及可能對柱填料產(chǎn)生破壞作用的基團離子,。在進樣前應盡可能對樣品進行分離提純以除去多余雜質(zhì)組分,。
03 避免過高柱壓
雖然高效液相色譜柱能耐受的壓力可達6000psi (磅/平方英寸)，但過高及過大的壓力變化均會縮短色譜柱的壽命,，避免的方法是：
1）柱壓過高時,，盡可能采用較小的流速，以不超過柱最大允許壓力的一半為宜,。
2）當流速較大時,，應采取流速梯度的辦法使流速分步到位,。
3）使用手動進樣閥時,，進樣閥的切換要盡可能的快。否則超過20%的壓力沖擊會很快使柱報廢,。當使用多柱聯(lián)用時,，柱切換要避免在高壓下進行。
04注意溫度和酸堿度
一般以硅膠為基質(zhì)的色譜柱最高使用溫度不超過60℃,，以低于40℃為宜,，特別是在流動相pH接近使用限度時，更應降低使用溫度,。
溫度過高會加快鍵合相的水解和硅膠的溶解,，從而使填料性質(zhì)改變，柱床塌陷,，降低柱效,，改變峰形。
請您留意色譜柱說明書中的pH適用范圍,，目前市面上大部分鍵合硅膠色譜柱表示的pH適用范圍是2-10,，但在實際使用時應避免ji端的pH條件。（當pH≤2時,，建議使用月旭Ultimate® LP系列色譜柱,；當pH≥8時,，建議使用月旭Xtimate®系列色譜柱）。若您原有的色譜柱在偏堿性條件（pH≥8）下使用,，可通過以下方法避免柱損害：
1）在泵和進樣閥之間加裝預柱（飽和柱）來飽和流動相,。
2）降低使用溫度。
3）檢驗完畢后立即用與所使用的流動相互相混溶的“溫和溶劑"徹di清洗,。
05 正確及時的沖洗
開始試驗前,，應了解柱中當前是何種溶劑。對于新色譜柱,，如無特殊說明均為評價報告中所用流動相,。柱中當前溶劑一定要與分析樣品所用流動相互溶，如不能混溶,，要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過渡,。
06 加裝保護柱
保護柱的作用：過濾掉來自流動相和樣品的化學“拉圾"同時也可以有效除去流動相和樣品中的不溶物。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動相吸入口,、進樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有不同孔徑的在線過濾器,，但在線過濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學污染，因此,，加裝保護柱是必要的,，特別是在分析中藥、中成藥等復雜混合物和生物樣品時更是保護分析柱bi不可少的措施,。
保護柱填料應與分析柱一致,，粒徑可較分析柱大。保護柱屬消耗品,，經(jīng)過一定次數(shù)的樣品分析（50～100次）后,，出現(xiàn)柱壓顯著升高或峰形變壞或基線漂移時，應考慮更換保護柱,。