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不可不知,，反相流動(dòng)相該如何選擇
在HPLC中,，流動(dòng)相是純?nèi)軇┗蛘呋旌先軇┮约皫в泄腆w改性劑的溶劑,。色譜工作者可以針對(duì)HPLC的不同應(yīng)用在數(shù)百種溶劑中進(jìn)行選擇,。溶劑的選擇要考慮諸多因素，如溶劑的粘度,、折射率,、腐蝕性、透明度等,，還有商業(yè)價(jià)格,。流動(dòng)相的溶劑強(qiáng)度或有機(jī)溶劑百分比可控制分析物的保留時(shí)間。
1,、什么是流動(dòng)相
流動(dòng)相是使分析物通過色譜柱的溶劑,。分析物存在于適當(dāng)?shù)娜軇┲?，在樣品制備后注入色譜柱系統(tǒng)。該溶劑不被視為新基質(zhì),，因?yàn)樗粫?huì)干擾分析,。可以在樣品制備過程中選擇分析物的載體的性質(zhì),，以滿足特定要求,，例如揮發(fā)性和與HPLC中流動(dòng)相的混溶性。在反相色譜柱中,，流動(dòng)相比固定相更具極性,。一般來說極性流動(dòng)相是shou選，因?yàn)榉蛛x效果表現(xiàn)出更好的重現(xiàn)性,。
分析物在流動(dòng)相中的溶解度在色譜柱中也起著重要作用,。對(duì)于溶于水或部分水性溶劑的化合物，選擇反相HPLC不是問題,，但對(duì)于不溶于極性溶劑的化合物,，通常需要使用正相色譜柱。樣品極性,，固定相極性和流動(dòng)相極性的評(píng)估對(duì)于色譜柱的選擇也很重要,。
2、流動(dòng)相的一般選擇要求
純度
所有溶劑都應(yīng)該具有最高的純度和質(zhì)量,。HPLC級(jí)溶劑經(jīng)過預(yù)過濾和純化,，在紫外線下具有最小的吸光度。因此,，他們不含會(huì)在色譜圖基線中產(chǎn)生假峰的雜質(zhì)。緩沖液制備中使用的水具有最高純度,。去離子水通常含有痕量有機(jī)化合物,，因此不推薦用于HPLC。
粘度
為了保持可接受的壓降（＜2500psi）和合理的流過HPLC色譜柱的流速,，流動(dòng)相粘度應(yīng)盡可能低,。較低粘度的流動(dòng)相產(chǎn)生狹窄的色譜峰。例如乙腈通常是反相HPLC的shou選溶劑,，因?yàn)樗粌H粘度低于甲醇或異丙醇,，而且具有良好的保留特性。
沸點(diǎn)
如果涉及樣品回收,，沸點(diǎn)很重要,，低沸點(diǎn)溶劑更容易從樣品中去除。
無(wú)腐蝕性
溶劑必須對(duì)HPLC系統(tǒng)組件無(wú)腐蝕性,。
混溶性
并非所有HPLC溶劑都可混溶,。如果混合了不能混合的溶劑可能會(huì)導(dǎo)致一些問題,，例如不穩(wěn)定的基線，波動(dòng)的壓力等,。異丙醇可與大多數(shù)常見的HPLC溶劑混溶,。因此，在不確定最后使用的溶劑系統(tǒng)的情況下,，它可以用來沖洗HPLC的流路