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影響峰漂移的常規(guī)因素有哪些,？
相信大部分實驗室工作者在日常檢測中，或多或少都有遇到過讓大家比較頭痛的一個實驗現(xiàn)像就是：當(dāng)我們連續(xù)進樣的時候,，樣品的保留時間不能重現(xiàn),，主要分為保留時間漂移和保留時間波動。顧名思義前者是指保留時間僅沿單方向發(fā)生變化,，而后者指保留時間無固定規(guī)律的波動,。一般在查找原因時將此兩種情況區(qū)分開來排查，對找到問題的原因往往很有幫助,。
如果我們觀察到保留時間漂移,，首先應(yīng)考慮色譜柱是否已用流動相wan全平衡。通常平衡需要10-20個柱體積的流動相,，但如果在流動相中加入少量添加劑（如離子對試劑）則需要相當(dāng)長的時間來平衡色譜柱,。
固定相穩(wěn)定性
固定相是否穩(wěn)定也是保留時間漂移原因之一，固定相的穩(wěn)定性都是有限的,，即使在推薦的PH范圍內(nèi)使用,，固定相也會慢慢水解。例如,，硅膠基質(zhì)在pH4時水解穩(wěn)定性最好,。水解速度與流動相類型和配體有關(guān)。雙官能團配體和三官能團配體比單官能團配體的鍵合相要穩(wěn)定,；長鏈鍵合相比短鏈鍵合相穩(wěn)定,；烷基鍵合相比氰基鍵合相穩(wěn)定的多。
其他硅膠基質(zhì)鍵合相在高比例水溶液環(huán)境中也可以發(fā)生水解,，如氨基鍵合相等,。
流動相組成
流動相組成的緩慢變化也是保留時間漂移的常見原因。如流動相中易揮發(fā)組分的揮發(fā)及循環(huán)使用流動相等,。流動相污染也可能是原因之一,。溶于流動相中的少量污染物可能慢慢富集到色譜柱上，從而造成保留時間的漂移,。建議及時更換新的流動相,。
疏水坍塌
當(dāng)反相填料色譜柱使用接近100%的水為流動相時，有時會發(fā)生分離突然喪失及被分析物質(zhì)保留明顯降低或wan全不保留的現(xiàn)象,，這就是疏水坍塌,。此現(xiàn)象是由流動相不浸潤固定相表面而致。當(dāng)色譜柱出現(xiàn)疏水坍塌也是保留時間漂移的常見原因,。常規(guī)的C18柱已經(jīng)可以在95%左右的水相環(huán)境下正常使用而不發(fā)生疏水塌陷現(xiàn)象,。純水中使用,，則建議使用經(jīng)過修飾改性的專用耐水柱進行實驗（例如月旭的Ultimate® AQ-C18)。
色譜柱污染
保留時間漂移的另一個常見原因是色譜柱污染,。如方法已經(jīng)建立,，在開始時沒問題，在使用一段時間后出現(xiàn)這個問題,，可能是由于色譜柱污染引起的,。這時需要對色譜柱加強沖洗，即使用比方法流動相更強的溶劑沖洗色譜柱,。也可以在檢測樣品基質(zhì)比較臟時提前加保護柱,。
其他因素
如果泵或者管路中有氣泡，保留時間會前后漂移,，可通過排氣等將氣泡趕出,。泵單向閥中的寶石球磨損，造成流動相倒流,，壓力不穩(wěn)定,，保留時間會前后漂移。解決辦法是更換部件,。泵比例閥控制失靈,，不同流路流動相比例不斷變化，保留時間會前后漂移,。解決方法是更換部件,。泵活塞桿密封墊老化，流動相滲漏,。解決辦法是換密封墊。在線混合器混合能力變差,，不接梯度測試混合能力,，并同手工配置流動相比較。