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梯度洗脫在反相色譜中的作用（下篇）
梯度洗脫可用于處理不能以等度洗脫分離的樣品，而最常見的使用梯度的因素是多成分保留能力不同,，無法在等度洗脫中全洗脫出來,，或以等度方式無法達(dá)到滿意的分離效果,?？偨Y(jié)下來,，以下幾種情況,，可以采用梯度洗脫：
1,、多組分樣品的極性范圍大，用等度無法全部洗脫的樣品,；
2,、大分子樣品；
3,、改善峰峰型,；
4、目標(biāo)峰出峰后,，短時間內(nèi)提高有機(jī)相比例,，洗脫強(qiáng)保留干擾雜質(zhì)；
5,、用等度洗脫無法達(dá)到分離的情況,。
#01
目標(biāo)峰出峰后，短時間內(nèi)提高
有機(jī)相比例,，洗脫強(qiáng)保留干擾雜質(zhì)
在檢測復(fù)雜成分的樣品時,，往往存在些強(qiáng)保留物質(zhì)，采用等度,，無法把強(qiáng)保留的雜質(zhì)洗脫下來,，一針哪怕采集再久，也會有未知雜質(zhì)干擾后面進(jìn)樣的效果,，這種情況下,，可以增加梯度洗脫，使強(qiáng)保留成分在梯度上洗脫出來的方式來解決,。
示例：
由上面三張圖可見,，此中藥，在采用等度洗脫時,，因有強(qiáng)保留未知雜質(zhì),，連續(xù)進(jìn)樣,，會在后面的進(jìn)樣出峰，干擾檢測,。在待測成分出峰后,，增加梯度，提高有機(jī)相比例,，強(qiáng)保留物質(zhì)在當(dāng)針就洗脫下來,，連續(xù)進(jìn)樣確認(rèn)，效果能wan全重現(xiàn),，后面進(jìn)樣不會出現(xiàn)未知干擾峰影響,。
#02
用等度洗脫無法達(dá)到分離的情況
有些物質(zhì)，特別是結(jié)構(gòu)相近的物質(zhì),，等度條件下無法達(dá)到分離,，而采用梯度模式，因組分在有機(jī)相變化的選擇性差異,，可以達(dá)到分離,，這種情況下就需要采用梯度條件進(jìn)行測試。
示例：
