HPLC常見問題及解決方法
原因及解決辦法
柱溫波動:控制好柱子和流動相的溫度,,檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對著柱溫箱。
流通池被污染或有氣體:用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池(最好斷開柱子)。如有需要,可以用1N的硝酸(不要用鹽酸)。
紫外燈能量不足:更換新的紫外燈,。
流動相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成:檢查流動相的組成,,使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑,。
流動相的pH值沒有調(diào)節(jié)好:加適量的酸或堿調(diào)至最佳pH值。
原因及解決辦法
柱溫變化:在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱,。
色譜柱沒有平衡好:在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱,。
柱污染:每天沖洗柱。
柱內(nèi)條件變化:穩(wěn)定進(jìn)樣條件,,調(diào)節(jié)流動相,。
柱壽命到:更換色譜柱。
原因及解決辦法
柱超載:降低樣品量,,增加柱直徑采用較高容量的固定相,。
柱干擾:清潔樣品,調(diào)整流動相,。
柱效下降:采用較低腐蝕條件,,更換柱,采用保護(hù)柱,。
柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效:更換燒結(jié)不銹鋼,,增加在線過濾器,過濾樣品,。
柱塌陷或形成短通道:更換色譜柱,,采用弱腐蝕條件。
死體積或柱外體積過大:連接點(diǎn)降至zui低,,對所有連接點(diǎn)做合適調(diào)整,,盡可能采用細(xì)內(nèi)徑連接管,。