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色譜柱的使用注意事項及維護(hù)

閱讀:1798      發(fā)布時間:2020-8-25
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  在日常分離分析工作中,,色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,,色譜柱使用是否得當(dāng),直接影響色譜柱的壽命,,稍有不慎就會降低柱效,、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,,需要注意下列問題,,以維護(hù)色譜柱。
 
  (1)柱子在裝卸,、更換時,,動作要輕,接頭擰緊要適度,。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動,,以免柱床產(chǎn)生空隙。
 
  (2)如果儀器用來做儀器分析 ,,樣品種類有限,,但分析次數(shù)多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱,,這樣有助于延長柱子的壽命,。
 
  (3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動,。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料,,因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進(jìn)行,,在閥進(jìn)樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
 
  (4)應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,,特別是反相色譜中,,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?br /> 
  (5)如使用柱溫控制裝置時,,應(yīng)注意在通人流動相后才能升溫,。
 
  (6)一般說來色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時,,才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì),。否則反沖會迅速降低柱效。
 
  (7)選擇使用適宜的流動相,,以避免固定相被破壞,。有時可以在進(jìn)樣器前面連接一個預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時,,預(yù)柱為硅膠,,可使流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解,。
 
  (8)避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi),,需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱,。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換,。
 
  (9)經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì),。在進(jìn)行清洗時,,對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,,即常規(guī)分析需要50-75mL,。
 
  (10)保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,,防止溶劑揮發(fā)干燥,。**禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間。
 
  (11)色譜柱使用過程中,,如果壓力升高,,一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗;另一種可能是大分子進(jìn)人柱內(nèi),,使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,,死體積增大。
 
  (12)在完成分離分析工作之后,,不應(yīng)立即停機(jī),需及時對色譜分析系統(tǒng)進(jìn)行沖洗,,一般0.5h以上,,以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。
 

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