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反相液相色譜柱如何選擇緩沖液PH值
反相液相色譜柱中緩沖體系PH值的選擇在反相液相色譜分析中,，選擇正確的緩沖液PH值,，對可離解的化合物分析的重現(xiàn)性十分重要，不恰當(dāng)?shù)腜H值可能導(dǎo)致不對稱峰,，寬峰,，分裂峰或肩峰，而尖銳的,，對稱的峰是定量分析中獲得低的檢測限以,，兩次分析之間較低的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)和保留時間的高重現(xiàn)性的前提。
反相液相色譜柱如何選擇緩沖液PH值
在選擇緩沖液PH值之前,，應(yīng)先了解被分析物的Pka,，高于或低于Pka兩個PH值單位的，有助于獲得好的,、尖銳的峰,，從HH公式：PH=Pka+log([A-]/[A])得知，溶液 PH值高于或低于Pka兩個單位,，化合物中99%以一種形式存在,，而一種形式存在的化合物才能獲得好的尖銳的峰。
如果選擇不到合適的,，樣品的pKa與流動相的pH非常接近,，那么流動相pH微小的變化，都會引起樣品保留時間較大的變動,。
當(dāng)化合物只有氨基時,，緩沖體系的選擇十分簡單，大多數(shù)氨基化合物在PH值小于9時都被質(zhì)子化，所以所有PH值在7或更低的溶液均適合應(yīng)用,，你也許會問水的 PH值大約是7,，為什么還用緩沖鹽,，因為緩沖鹽有助于增加方法的可靠性,，以及色譜峰的尖銳性，PH值的降低有助于氨基化合物保留的減弱,，減小化合物與硅膠表面硅羥基的作用,，而使峰更尖銳，任何緩沖液均可應(yīng)用于氨基化合物的分析,，但我們認為PH值等于3的磷酸鉀鹽適合用于氨基化合物的分析,。
在上面兩個例子中，PH=3的磷酸鉀鹽都能獲得良好的應(yīng)用,，在一般情況下,，它是含羧基和氨基化合物分析中的緩沖液，并且我們認為在氨基化合物分析中鉀鹽比鈉鹽更好,。