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問君幾多愁，恰似一支氨基柱超難留!
當您使用氨基柱時,，有沒有遇到在使用一段時間之后,，柱效下降、柱壓升高,，使得檢測結(jié)果逐漸達不到要求,？或者柱子在使用過程中出現(xiàn)異常干擾峰，或者保留時間出現(xiàn)漂移,，與之前的檢測結(jié)果有較大偏差,？又或者是柱子的專一選擇性，使得在特定色譜條件下方法得不到重現(xiàn),，分離度,、柱效和拖尾因子達不到檢測要求？由于氨基柱的*性,，進而使用問題較多,，這給我們帶來了很多的困擾，那么今天就來談?wù)劙被?/span>
氨基柱的鍵合官能團是氨丙基,，這種官能團比常規(guī)的C18,、C8和C4易水解，所以在使用氨基柱之前,，我們就要做好心理準備,，氨基柱的使用壽命比常規(guī)色譜柱要短很多。
氨基柱既可以做正相,，也可以反相使用,，而這兩相溶劑是不能互溶的，所以如果在正反相進行切換使用時,，需要用異丙醇進行過渡,。下面將分別談?wù)劙被谡磧上嘀械氖褂门c維護注意事項。
反 相
?反相使用時，如果流動相不含有酸堿鹽,，做樣結(jié)束直接用100%的乙腈進行沖洗和保存即可,。若含有酸堿鹽，首先用60%的乙腈水沖洗40min,，然后再用100%的乙腈沖洗和保存,；
?反相使用時，注意流動相的pH范圍,，pH越低越容易水解,，理想的pH范圍是3-7，流動相中水的比例越高,，也越容易水解,。
PS：柱子使用后，沖洗后建議保存在純的有機相中,，這樣能獲得良好的保存效果以及延長柱子的使用壽命,。此外如柱子出現(xiàn)了柱壓升高，峰形異常,，柱效和分離度下降等異常情況后,，可以先用過渡流動相沖掉色譜柱的鹽，再分別以做樣流速用100%乙腈→100%甲醇→100%異丙醇→100%乙腈進行沖洗,，每項沖洗30分鐘,，其中異丙醇由于黏度大，所以需要降低流速,。
正 相
柱子的沖洗使用100%的正己烷,，然后使用正己烷/異丙醇（90/10）進行保存。
此外,，正相色譜中,，固定相的水分含量是影響選擇性的關(guān)鍵參數(shù)，而流動相存在的水分含量會影響到保留時間和分離度,，所以出現(xiàn)保留時間波動較大,，可以歸因于固定相和流動相中水分的變化,，建議對氨基柱進行除水：
?去除固定相中的水分：
用含2.5%二甲氧基丙烷（dimethoxypropane）和2.5%冰醋酸的正己烷沖洗色譜柱30倍柱體積,；
?使用水分含量可控的流動相（比如水半飽和）：
半飽和流動相配置：將無水的非極性流動相分成兩半，其中一半中加入一定量水,，并混勻攪拌約1小時,，靜止分層后，將多余的水相全部除去,，將兩部分重新混合在一起就配成了“半飽和”流動相,。
PS：如果出現(xiàn)柱壓升高、分離度和柱效下降等異常情況，建議用100%異丙醇→100%甲醇→100%異丙醇以分析流速分別沖洗,，每項沖洗40分鐘,。同樣，異丙醇沖洗時需降低流速,。
乳糖專用柱
月旭還有一款特殊氨基柱,，乳糖專用柱 Xtimate®Lactose-NH2，我們建議采用純乙腈進行沖洗和保存,，如果柱壓升高,，分離度和柱效下降等異常情況，可以用純甲醇→純乙腈→純異丙醇→純乙腈分別進行沖洗,，每項3小時,。
在使用乳糖專用柱檢測時，如果出現(xiàn)噪音增加,、漂移增大,、分離度達不到或者柱效不夠等異常情況，需要注意以下幾點：
?流動相混合在一起,，充分搖勻,，真空抽濾，超聲脫氣10分鐘,，使用一個通道運行,，不要使用在線過濾器；
?進樣體積需要嚴格按照藥典要求,，進樣10μL,，盡可能地將定量環(huán)更換成10μL定量環(huán)，減小柱外死體積的影響,，下面左圖和右圖分別是進樣20μL和進樣量10μL的色譜圖,，對比非常明顯；
?由于示差檢測器對溫度的變化比較敏感,，建議將柱溫箱用干毛巾或者干的棉花填充,，充當傳熱介質(zhì)，使得有更好的基線噪音和色譜效果,。
由于氨基鍵合官能團*的極性,，易水解，導致氨基柱的使用壽命較其它常規(guī)色譜柱要短,，所以我們需要認清這個事實,。希望以上的使用和維護方法可以幫到您，極大地延長氨基柱的壽命,。