制備譜圖峰分叉,?我們有辦法,,不用怕!
大家好,,我們的答疑解惑板塊好久不見咯~
小編近收到了許多關(guān)于制備柱使用維護(hù)的一些問題,,今天小編就整理了幾個(gè)大家提問頻率比較高的,比如:制備譜圖中出現(xiàn)峰分叉,、流速的壓力,、填料耐壓多少以及使用等方面的問題,并邀請來月旭科技的技術(shù)工程師來為大家解答,。一起來看看吧~
Q1,、制備譜圖中出現(xiàn)峰分叉,可能有哪些原因,,該怎么辦,?
峰分叉又稱為裂峰,有可能是色譜柱以外的色譜條件發(fā)生了變化,,或者色譜柱本身受損發(fā)生了變化,。
A、樣品濃度較高,,上樣量較大,,導(dǎo)致峰分叉,;只需要減少上樣量即可。
B,、色譜柱柱頭被污染引起的峰分叉,;使用合適的溶劑沖洗色譜柱。
C,、柱壓太高致使柱頭塌陷引起峰分叉,;在柱頭端增補(bǔ)填料或者更換新色譜柱。
D,、溶解樣品的強(qiáng)度比流動(dòng)相強(qiáng),,溶劑效應(yīng)引起峰分叉;使用流動(dòng)相溶解樣品即可,。
E,、固體顆粒堵塞分配器,分配不均勻?qū)е路宸植?;更換柱頭端分配器即可,。
Q2、我要單次上樣0.5-1g樣品,,請問我該用什么制備柱,?
建議使用30*250mm或者50*250mm的制備柱?;幙梢园凑彰?00g填料可以上樣1g樣品的方法進(jìn)行簡單的計(jì)算,,得到應(yīng)該使用多大的制備柱或者相應(yīng)的填料量。多肽樣品由于自身的特殊性,,純化同樣質(zhì)量的樣品,,需要更多的填料。一般認(rèn)為多肽樣品100g填料可以上樣0.1g樣品,。
Q3,、我購買了一根Ultimate XB-C18,5um,,21.2*250mm,,請問該柱的流速、壓力是多少,?
正常情況下,,21.2mm色譜柱的zui jia流速20mL/min。我們公司該色譜柱出廠使用甲醇:水=75;25測試,,壓力為15Mpa,。其他型號的制備柱流速可以參考下表。
Q4,、我要裝填DAC,,請問你們的填料耐壓是多大的,?會不會導(dǎo)致填料壓碎?
DAC裝填時(shí),,為了確保填料不被壓碎,,需要在填料能夠承受的壓力范圍內(nèi)裝填。月旭色譜填料采用特殊的加工處理工藝,,使填料耐壓性能更好,,有利于DAC的裝填。填料的耐壓情況參考下表: