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液相色譜填料的正確使用

閱讀:3122        發(fā)布時(shí)間:2017/7/24
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液相色譜填料的正確使用:
(1)柱子在裝卸,、更換時(shí),動(dòng)作要輕,,接頭擰緊要適度,。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動(dòng),以免柱床產(chǎn)生空隙,。
(2)如果儀器用來做常規(guī)分析,,樣品種類有限,,但分析次數(shù)多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱,,這樣有助于延長柱子的壽命,。
(3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動(dòng)柱內(nèi)填料,,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩。
(4)應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,,特別是反相色譜中,,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?/div>
(5)如使用柱溫控制裝置時(shí),,應(yīng)注意在通人流動(dòng)相后才能升溫,。
(6)一般說來色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),,才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì),。否則反沖會迅速降低柱效。
(7)選擇使用適宜的流動(dòng)相,,以避免固定相被破壞,。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一個(gè)預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),,預(yù)柱為硅膠,,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解,。
(8)避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi),,需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個(gè)保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱,。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換,。
(9)經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì),。在進(jìn)行清洗時(shí),,對流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡。
(10)保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,,柱接頭要擰緊,,防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時(shí)間,。
(11)液相色譜填料使用過程中,,如果壓力升高,一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,,這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗,;另一種可能是大分子進(jìn)人柱內(nèi),,使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,,死體積增大,。
(12)在完成分離分析工作之后,不應(yīng)立即停機(jī),,需及時(shí)對色譜分析系統(tǒng)進(jìn)行沖洗,。

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