標(biāo)記二抗能與抗原特異性結(jié)合是可以結(jié)合的。如果一抗與將抗原*結(jié)合,，則二抗處不會(huì)出現(xiàn)結(jié)合反應(yīng)現(xiàn)象,，如果一抗不足以將抗原*結(jié)合，則多于抗原會(huì)大刀二抗處反應(yīng),。一抗一般是特異性抗體,，二抗一般通用羊抗鼠、羊抗兔之類就可以,。但是還需要首先得弄懂抗原,、一抗、二抗的相互作用,。
標(biāo)記二抗是能和抗體結(jié)合,，即抗體的抗體，其主要作用是檢測(cè)抗體的存在,，放大一抗的信號(hào),。二抗是利用抗體是大分子的蛋白質(zhì)具有抗原性的性質(zhì)，去免疫異種動(dòng)物,，由異種動(dòng)物的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的針對(duì)于此抗體的免疫球蛋白,。用抗AIV H5亞型血凝素單克隆抗體為包被抗體,兔抗AIV IgG為第二抗體。
標(biāo)記二抗原理：
是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),，將抗原,、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體——聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,，每加入一種試劑孵育后,，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性,。在實(shí)際應(yīng)用中,，通過不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種,。即:用于檢測(cè)抗體的間接法,、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法,。
標(biāo)記二抗選擇要點(diǎn)：
1,、種屬來源。主要根據(jù)一抗種屬來源來決定購買二抗來源,，如一抗是小鼠來源,，那二抗就買抗小鼠的即可。
2,、標(biāo)記物的選擇,。有HRP、Biotin,、熒光素等標(biāo)記物,。一般SP三步法二抗選擇Biotin標(biāo)記的二抗，以與后面的SP結(jié)合反應(yīng),，而免疫熒光染色就需要購買不同熒光素標(biāo)記的二抗,，如羅丹明、FITC,、Cy3等常用熒光素,。
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