DNA聚合酶是PCR反應(yīng)中*組成部分,,是參與DNA復(fù)制中的重要酶,,被用在生物及醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的各個研究方向上,。PCR技術(shù)發(fā)明至今40多年的時間里,,從早期被發(fā)現(xiàn)的Taq DNA聚合酶到現(xiàn)在,酶越來越多樣化,。隨著新酶的發(fā)現(xiàn)和對舊酶的改造,,DNA聚合酶的保真性、特異性,、靈敏度等都獲得了明顯的改進,。而高保真DNA聚合酶的出現(xiàn)正是順應(yīng)了市場需求,下面小編將圍繞高保真DNA聚合酶的作用原理和應(yīng)用方向等進行介紹,。
一,、什么是什么是高保真酶
高保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心,聚合中心具有5'→3'的DNA聚合酶活性,,可沿5'→3'方向催化合成DNA,;酶切中心具有3'→5'外切酶活性,可以進行堿基錯配的修復(fù),。常見的高保真DNA聚合酶類型有Pfu,、KOD等。
二,、如何選擇高保真酶
對于測序,、基因功能研究、蛋白表達,、定點突變等,,高保真性的擴增是非常重要的,可以確保各種擴增子的可靠擴增,。以測序文庫擴增過程為例,,測序過程中的突變會給序列拼接造成困難,甚至?xí)蓴_某些需要低頻檢測的分析結(jié)果,。對于市場上琳瑯滿目的各種高保真DNA聚合酶,,選擇一款合適的酶產(chǎn)品是極為必要的。市面上常見的高保真酶特性主要包含保真度、擴增速率,、特異性,、是否耐U等。
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