核酸抽提與純化是分子生物學試驗的基礎(chǔ)，核酸純化方法是影響提取核酸質(zhì)量高低的最重要因素,，也是下游分子生物學試驗成敗的關(guān)鍵,。
核酸純化的方法及原理如下：
一、PC抽提法
PC 抽提是去除蛋白質(zhì)有效的手段,，但超過了該飽和度,，裂解體系中的蛋白質(zhì)不會被一次去除，必須靠多次抽提,，方可*去除,。且每次抽提都會損失部分核酸。另外,，體系太粘稠的壞處是,，蛋白質(zhì)難以*去除，以及基因組 DNA 會斷裂得更厲害,，所以要注意裂解液與樣品的比例,。PC 抽提的另外一個用途是，利用酸性酚可以部分去除 DNA 的特點，在 RNA 抽提時獲得 DNA 殘留極少的 RNA,。不過有一點要提醒的是,，某些植物樣品，在去除某些雜質(zhì)之前,，是不能使用 PC 抽提的,，否則核酸必定降解。PC抽提最大的優(yōu)勢是成本低廉,，對實驗條件要求較低,，對于經(jīng)費緊張的實驗室較為實用。
二,、高鹽沉淀法
高鹽沉淀蛋白質(zhì)/醇沉淀方法,，同樣也是一個非常不錯的方法。與 PC 抽提方法相比,，除了純度的穩(wěn)定性可能要低一點外,，該方法幾乎克服了 PC 抽提的所有缺點。更快,、更輕松的去除蛋白質(zhì)所可以用于大規(guī)模抽提,，但其不足之處是純度 (蛋白質(zhì)殘留) 不夠穩(wěn)定，蛋白質(zhì)的沉淀效率在4℃會更好一些,。
三,、離心柱法
離心柱純化法，是目前試劑盒提取廣泛應用的方法,。其最大特點是受人為操作因素影響小,，純度的穩(wěn)定性很高 (雖然純度不一定比PC 純化方法更高)。加入的液體通過離心后會進入另外一個離心管中,，與含有核酸的柱子*是分開的,，所以洗滌更*。其致命弱點是樣品過量,，提取效率較低,，且需要反復離心，操作復雜,，成本也較高,。
四、生物磁珠法
生物磁珠法是將純化介質(zhì)包被在納米級生物磁珠表面,，通過介質(zhì)對核酸的吸附,，在外加磁場下使核酸附著于磁珠定向移動，從而達到固液分離純化的作用,。與其他幾種方法相比,，生物磁珠法具有很多的優(yōu)勢,，如：
①提取靈敏度高(微量材料即可提取)
?、诩兓兌雀?*與蛋白鹽等雜質(zhì)分離)
?、厶崛‘a(chǎn)量高(每mg磁珠能吸附500ug DNA)
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