液相色譜儀系統(tǒng)的發(fā)展歷史：

    1960年代,，由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,，為了分離蛋白質(zhì),、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì)，氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜,。1960年代末科克蘭（Kirkland）,、哈伯、荷瓦斯(Horvath),、莆黑斯,、里普斯克等人開發(fā)了世界上*臺液相色譜儀，開啟了液相色譜的時代,。液相色譜使用粒徑更細(xì)的固定相填充色譜柱,，提高色譜柱的塔板數(shù)，以高壓驅(qū)動流動相,，使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內(nèi)完成,。

    1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現(xiàn)代實踐》一書，標(biāo)志著液相色譜法 (HPLC)正式建立,。在此后的時間里,，液相色譜成為zui為常用的分離和檢測手段，在有機化學(xué),、生物化學(xué),、醫(yī)學(xué)、藥物開發(fā)與檢測,、化工,、食品科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測,、商檢和法檢等方面都有廣泛的應(yīng)用,。液相色譜同時還極大的刺激了固定相材料、檢測技術(shù),、數(shù)據(jù)處理技術(shù)以及色譜理論的發(fā)展,。

    1960年代前，使用的填充粒大于100μm,，提高柱效面臨著困境,，后來的研究人員便采用微粒固定相來突破著一瓶頸?？瓶颂m,、荷瓦斯制備成功薄殼型固定相，這種在固定相在玻璃微球表面具有多孔薄殼,，實現(xiàn)了高速傳質(zhì),，為液相色譜技術(shù)的發(fā)展奠定了穩(wěn)固的基礎(chǔ)。隨著填料粒徑的降低,，更高的柱效也得以實現(xiàn),。1960年代研制出氣動放大泵,、注射泵及低流量往復(fù)式柱塞泵，但后者的脈沖信號很大,，難以滿足液相色譜的要求,。1970年代，往復(fù)式雙柱塞恒流泵,，解決了這一問題,。1970年代后科克蘭制備出全多孔球形硅膠，平均粒徑只有7μm,，具有*的柱效,，并逐漸取代了無定形微粒硅膠。之后又制造出的鍵合固定相使柱的穩(wěn)定性大為提高,，多次使用成為可能,。1970年后，適合分離生物大分子的填料又成為研究的熱點,。1980年后,，改善分離的選擇性成為色譜工作者的主要問題，人們越來越認(rèn)識到改變流動相的組成是提高選擇性的關(guān)鍵,。