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分析型液相色譜系統(tǒng)是有五大部分構(gòu)成

時(shí)間:2016-3-25 閱讀:1079
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     分析型液相色譜系統(tǒng)是有五大部分構(gòu)成:動(dòng)力系統(tǒng),進(jìn)樣系統(tǒng),,分離系統(tǒng),,檢測(cè)系統(tǒng),數(shù)據(jù)分析和記錄系統(tǒng)構(gòu)成,。其中動(dòng)力系統(tǒng)是指泵,;進(jìn)樣系統(tǒng)是指六通閥和進(jìn)樣針,或者自動(dòng)進(jìn)樣器;分離系統(tǒng)是指色譜柱,;檢測(cè)系統(tǒng)是指檢測(cè)器,,一般有紫外檢測(cè)器,熒光檢測(cè)器,,示差折光檢測(cè)器,,MS檢測(cè)器等等;記錄系統(tǒng)是指電腦工作站等,,而連接這些設(shè)備的都是由一根根不銹鋼管或者PEEK管構(gòu)成,。
    1、動(dòng)力系統(tǒng):
    分析型液相色譜系統(tǒng)的動(dòng)力,,實(shí)際上是鋼瓶中氣體的壓力,。而液體,它只有通過(guò)泵的轉(zhuǎn)動(dòng)而使之流動(dòng),。我們做一個(gè)類比:血液類比成流動(dòng)相,,心臟類比成泵。血管類比成各不銹鋼管,。那么,,血液在心臟作為動(dòng)力系統(tǒng),流經(jīng)著身體的各個(gè)系統(tǒng),。如果心臟跳得快點(diǎn),,那么血流量加大,那么血壓升高,。同樣,,泵流速提高,流動(dòng)相流量增大,,那么色譜系統(tǒng)壓力增高,;如果血管被壓迫半堵了,那么同樣的心跳速度,,壓力也會(huì)增高,。同樣道理,如果色譜系統(tǒng)被污染,,那么污染物堵在色譜柱頭,,或者各連接口等,那么泵同樣的流速,,就有可能壓力變大,。液相色譜主要出問(wèn)題的就是壓力莫名地增大,一般認(rèn)為是色譜系統(tǒng)被污染而堵,,解決的方法就是查看各個(gè)部件,,或者用過(guò)濾過(guò)的異丙醇清洗流路等,。
    2、進(jìn)樣系統(tǒng):
    現(xiàn)在很少用到手動(dòng)進(jìn)樣了吧,。大部分都用自動(dòng)進(jìn)樣,。自動(dòng)進(jìn)樣確實(shí)方便,只要安排好配制過(guò)的樣品的位次,,那么開(kāi)動(dòng)sequence run 就一個(gè)個(gè)地分析了,。要不說(shuō)說(shuō)手動(dòng)進(jìn)樣吧。進(jìn)樣設(shè)備是一個(gè)六通閥,。其中要進(jìn)樣的時(shí)候,,需要將六通閥轉(zhuǎn)到load狀態(tài),由于六通閥后面裝了一根定量環(huán),,所以,,樣品一定以大于三倍定量環(huán)體積地進(jìn)去,這樣,,保證定量環(huán)中充滿著樣品,,可以避免進(jìn)樣誤差。打個(gè)比方,,如果定量環(huán)是20μl的,,那么我們打入>60μl的樣品。然后轉(zhuǎn)到inj狀態(tài),,即可。還有需要注意的是,,HPLC 的進(jìn)樣針是平頭針,,而GC的進(jìn)樣針一定是尖頭針。因?yàn)闅庀噙M(jìn)樣要刺穿隔墊,,需呀尖頭,,而尖頭容易劃傷金屬,所以分析型液相色譜系統(tǒng)用的是平頭針,。
    3,、分離系統(tǒng):
    分離系統(tǒng)是分析型液相色譜系統(tǒng)的核心。我們現(xiàn)實(shí)生活中需要分析的樣品都是混合物,。所以,,分離后在分析。比如我們分析醬油中肌苷酸鳥(niǎo)苷酸,,那么醬油進(jìn)行稀釋處理,,注入色譜儀,肌苷酸,,鳥(niǎo)苷酸由于性質(zhì)不同被分離成兩個(gè)峰,。同時(shí)醬油中其他物質(zhì)也被分離。使得肌苷酸,鳥(niǎo)苷酸兩個(gè)峰十分清楚地呈現(xiàn),。我們需要清楚的是,,樣品的測(cè)試要保證測(cè)試的物質(zhì)被有效地分離,而不需要測(cè)試的物質(zhì),,沒(méi)有必要讓其分離,,這可以節(jié)省分析時(shí)間。
    4,、檢測(cè)系統(tǒng):
    HPLC的檢測(cè)器有紫外-可見(jiàn)檢測(cè)器,,(UV-VIS),熒光檢測(cè)器(FD),示差折光檢測(cè)器(RI),MS檢測(cè)器等等對(duì)于這些檢測(cè)器,,簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),,是兩點(diǎn):被檢測(cè)和濃度越大面積越大。對(duì)于示差折光,,它是通用性檢測(cè)器,,但是靈敏度不夠。測(cè)試一些沒(méi)有紫外基團(tuán)的物質(zhì),,比如如糖等,。
    5、記錄系統(tǒng):
    分析型液相色譜系統(tǒng)記錄系統(tǒng)主要記錄色譜圖,,并且對(duì)色譜圖進(jìn)行面積計(jì)算(積分),。同時(shí)可以用軟件計(jì)算出其他,比如峰寬,,塔板數(shù),,拖尾因子等。同時(shí)也可以通過(guò)輸入稱樣量和稀釋倍數(shù),,計(jì)算出測(cè)試樣品中各組分的含量,。

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