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改善液相色譜基線噪音的方法
液相色譜是為適應(yīng)出口而改進(jìn)的高性能高效液相色譜儀產(chǎn)品,儀器采購高標(biāo)準(zhǔn)的進(jìn)口原裝部件,符合相關(guān)國際標(biāo)準(zhǔn),性能穩(wěn)定可靠,面向全球銷售.液相色譜儀代表了zui新的液相色譜儀制造技術(shù)水平.產(chǎn)品已經(jīng)出口到美國,、加拿大、日本,、朝鮮、印度及非洲,、東南亞國家等國際市場,被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥,、化工、食品,、石化,、環(huán)保、能源,、冶金,、航空航天等工業(yè)生產(chǎn)過程和環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域.
基線噪音是做液相的同學(xué)經(jīng)常感到頭疼的問題,尤其是在做痕量分析的時(shí)候,。今天，我們來分析下噪音的來源,，以及如何減小和消除噪音,。
一.流動相的在線混合
流動相在線混合是為了簡化實(shí)驗(yàn)步驟，流動相混合的不充分是基線噪音的一個(gè)重要來源,。
流動相混合方式主要兩種：
1.低壓混合：采取時(shí)間脈沖的方式,，利用比例閥，將不同流動相按一定比例混合,。
2.高壓混合：利用多個(gè)泵頭,，控制每個(gè)泵的流量，來將流動相按一定比例混合,。
從流動相開始混合在一起,，到流動相到達(dá)色譜柱頭，這一段體積叫做延遲體積(Delay Volume),。混合器體積越大,，混合越好,，但是相應(yīng)延遲體積就越大，會造成梯度的延遲,。換句話說,，就是流動相的變化，需要一定時(shí)間后,，才能真正到達(dá)色譜柱,，對分離產(chǎn)生影響。這個(gè)現(xiàn)象在使用UPLC或者UHPLC的時(shí)候,，會有比較明顯的作用,。
那如何減小因?yàn)榛旌隙斐傻幕€噪音呢？
1.對于等度的方法：非常簡單,，預(yù)混流動相就可以了,。
2.對于梯度的方法：部分預(yù)混流動相也會幫助更好的混合，怎么做呢,？看下面的例子,。
方法要求乙腈/水比例從10%走到85%。那可以將流動相A配成10%的乙腈,，流動相B配成85%的乙腈,，然后A/B梯度從0%走到100%。這就是部分預(yù)混,。
3.增大混合器的體積：一般混合器的體積從幾百ul到幾ml都有,，在允許的延遲時(shí)間下,，更換一個(gè)體積更大的混合器，能夠有效提高混合的效率,。
二.液相硬件問題造成的基線噪音
如果液相系統(tǒng)某些地方的工作不正常,，也可能造成基線的噪音。
1.系統(tǒng)有漏：特別是肉眼無法發(fā)現(xiàn)的微漏或者泵的內(nèi)漏,，會造成流速的變化和混合比例的變化,，從而導(dǎo)致基線噪音。
檢查的方法就是對系統(tǒng)進(jìn)行壓力測試：將系統(tǒng)從某個(gè)地方用死堵堵上,，如泵出口,，或者自動進(jìn)樣器出口，將壓力升高到350bar后停泵,，監(jiān)測壓力下降的情況,。一般的標(biāo)準(zhǔn)是2-3bar/min的下降是正常水平?；蛘?5%/10min的下降,。
2.梯度比例問題：可以對系統(tǒng)進(jìn)行一個(gè)梯度測試，來檢查梯度混合是否準(zhǔn)確和一致,。
梯度測試
a.將A配成0.1%的丙酮,，B是水。
b.在265nm的波長下,，將A的比例從10%,，20%，30%這樣一個(gè)一個(gè)的升高,，每個(gè)比例走3min,。
c.可以根據(jù)計(jì)算，看每個(gè)基線臺階上升是否準(zhǔn)確,。
d.也可以從0-100%走一個(gè)連續(xù)的梯度,，看基線上升的平滑性和線性。
三.流動相脫氣不好造成的基線噪音
對流動相進(jìn)行脫氣,，不僅僅是為了防止系統(tǒng)里面氣泡的產(chǎn)生,。流動相脫氣越好，基線就會越好,。
如今zui常用的脫氣方式是在線脫氣機(jī),，但是有的時(shí)候脫氣并不*。所以當(dāng)有基線噪音問題時(shí),，可以考慮采取多種脫氣方式,。
前面三點(diǎn)講的都是內(nèi)在原因造成的基線噪音或者波動。如果你前面的原因都找過了，問題還沒有解決,，就得考慮一下是不是流動相里面有雜質(zhì)或是電路噪音,，我們下一節(jié)繼續(xù)講解。