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高效液相色譜儀按其分離機(jī)理,，可分為四種類型
高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的,、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。它由儲(chǔ)液器,、泵,、進(jìn)樣器、色譜柱,、檢測(cè)器,、記錄儀等幾部分組成。HPLC廣泛應(yīng)用于生命科學(xué),、食品科學(xué),、藥物研究以及環(huán)境研究中。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入檢測(cè)系統(tǒng),，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣本溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),，經(jīng)過反復(fù)多次的“吸附-解吸”的分配過程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,，通過檢測(cè)器時(shí)，樣本濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,，數(shù)據(jù)以圖譜形式輸出檢測(cè)結(jié)果,。
液相色譜儀按其分離機(jī)理，可分為四種類型,。
吸附色譜法的固定相為吸附劑,，色譜的分離過程是在吸附劑表面進(jìn)行的，不進(jìn)入固定相的內(nèi)部,。與氣相色譜不同,，流動(dòng)相（即溶劑）分子也與吸附劑表面發(fā)生吸附作用。在吸附劑表面,，樣品分子與流動(dòng)相分子進(jìn)行吸附競(jìng)爭(zhēng),，因此流動(dòng)相的選擇對(duì)分離效果有很大的影響，進(jìn)口液相色譜儀一般可采用梯度淋洗法來提高色譜分離效率,。
在聚合物的分析中,，吸附色譜一般用來分離添加劑，如偶氮染料,、抗氧化劑,、表面活性劑等,，也可用于石油烴類的組成分析。
分配色譜法
這種色譜的流動(dòng)相和固定相都是液體,，樣品分子在兩個(gè)液相之間很快達(dá)到平衡分配,，利用各組分在兩相中分配系數(shù)的差異進(jìn)行分離，類似于萃取過程,。
一般常用的固定液有β（ODPN）,、聚乙二醇（PEG400～4000）、*撐乙二醇（TMG）和角鯊?fù)椋⊿Q）,。采用與氣相色譜（GC）同樣的方法,，將固定液涂漬在多孔的載體表面，但在使用中固定液易流失,。目前,，應(yīng)用較多的是鍵合固定相。在這種固體相中,，固定液不是涂在載體表面,，而是通過化學(xué)反應(yīng)在純硅膠顆粒表面鍵合上某種有機(jī)基團(tuán)。
例如,，利用氯代十八烷基硅烷與硅膠表面的羥基（-OH）之間的反應(yīng)就可以形成一烷基化表面,。這種固定液的優(yōu)點(diǎn)是不易被流動(dòng)相剝蝕。在分配色譜法中,，流動(dòng)相可為純?nèi)軇?，也可以采用混合溶劑進(jìn)行梯度淋洗，其極性應(yīng)與固定液差別大一些,，以避免兩者之間相溶,。
在我們做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候用液相色譜儀分析過程的時(shí)候影響溶液遷移的因素比較多。同一樣的組分在不同的色譜調(diào)件下保留的值也會(huì)不同,，即使是在一樣的測(cè)定條件下,。同一組分在不同的色譜柱上面保留的數(shù)值差別也會(huì)不同。所以,，液相色譜和氣象色譜相對(duì)比,，定性的難度大很多，液相色譜儀分析經(jīng)常使用的定性方法有很多,。比如,，利用已知標(biāo)準(zhǔn)樣品定性，利用檢測(cè)器的選擇性定性或者利用紫外檢測(cè)器全波長(zhǎng)掃描功能等來定性,。