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淺談高效液相色譜儀原理與應用
在實驗中,,高效液相色譜儀常被用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物,,那么今天我們就來看看高效液相色譜儀結構原理與其應用,。
高效液相色譜儀
高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的,、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物的儀器設備,。它由儲液器、泵,、進樣器,、色譜柱、檢測器,、記錄儀等幾部分組成,。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經進樣器進入流動相,,被流動相載入色譜柱(固定相)內,,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中做相對運動時,,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,,通過檢測器時,,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據以圖譜形式打印出來,。HPLC廣泛應用于生命科學,、食品科學、藥物研究以及環(huán)境研究中,。
高效液相色譜儀結構與工作原理
高效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器,、泵、進樣器,、色譜柱,、檢測器,、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),,樣品溶液經進樣器進入流動相,,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),,在兩相中作相對運動時,,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,,被分離成單個組分依次從柱內流出,,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,,數(shù)據以圖譜形式打印出來,。
高效液相色譜儀的應用
高效液相色譜儀應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領域,。例如環(huán)境氣體分析,、藥物分析、茶葉的成分分析,、食品分析,、生物制藥、化工化工,、脂肪酸分析、氨基酸分析等方面,。
而高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,,固定相的種類繁多,,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質,。
與試樣預處理技術相配合,,HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,,能夠分離復雜相體中的微量成分,。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離,。
HPLC成為解決生化分析問題非常有前途的方法,。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度,、速度快,、色譜柱可反復利用,,流出組分易收集等優(yōu)點,因而被廣泛應用到生物化學,、食品分析,、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析,、無機分析等各種領域,。高效液相色譜儀與結構儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。
液相色譜-質譜聯(lián)用技術受到普遍重視,,如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等,;液相色譜-紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類,,海水中的不揮發(fā)烴類,,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。