在實(shí)驗(yàn)中,高效液相色譜儀常被用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的,、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物,,那么今天我們就來(lái)看看高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)原理與其應(yīng)用。
高效液相色譜儀
高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理,,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的,、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。它由儲(chǔ)液器,、泵,、進(jìn)樣器、色譜柱,、檢測(cè)器,、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),,樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),,在兩相中做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),,經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái),。HPLC廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中,。
高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)與工作原理
高效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器,、泵、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成,。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),,樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),,在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。
高效液相色譜儀的應(yīng)用
高效液相色譜儀應(yīng)用非常廣泛,,幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域,。例如環(huán)境氣體分析、藥物分析,、茶葉的成分分析,、食品分析、生物制藥,、化工化工,、脂肪酸分析、氨基酸分析等方面,。
而高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,,固定相的種類繁多,,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì),。
與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,,HPLC所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分,。隨著固定相的發(fā)展,,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離。
HPLC成為解決生化分析問(wèn)題非常有前途的方法,。由于HPLC具有高分辨率,、高靈敏度、速度快,、色譜柱可反復(fù)利用,,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué),、食品分析,、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析,、無(wú)機(jī)分析等各種領(lǐng)域,。高效液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。
液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等,;液相色譜-紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測(cè)定水中的烴類,,海水中的不揮發(fā)烴類,,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。