隨著我國經(jīng)濟(jì)與科研技術(shù)的提高,,我們的色譜技術(shù)也在不斷的進(jìn)步中,,制備色譜技術(shù)也得以大力發(fā)展,現(xiàn)已逐漸走出實(shí)驗(yàn)室,,廣泛應(yīng)用于生物,、醫(yī)藥等分離純化領(lǐng)域的工業(yè)生產(chǎn)。
制備色譜概述
制備色譜源于從混合物中分離得到化合物純品,,是一個分離,、純化及富集的過程,已成為分離科學(xué)中較有效的分離技術(shù)之一,。廣泛應(yīng)用于生物,、醫(yī)藥等分離純化領(lǐng)域的工業(yè)生產(chǎn),我們稱之為工業(yè)制備色譜(IndustrialPreparationChromatography,,簡稱IPC),。
制備色譜的目的
在說色譜制備之前,我們要先了解一下分析色譜,,分析色譜的目的是分析出混合物中一個(或者幾個)純物質(zhì)的含量,。而制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質(zhì),。工業(yè)制備色譜產(chǎn)品的主要用途是完成工業(yè)級樣品的純化,、分離及富集。
制備色譜的結(jié)構(gòu)組成
制備色譜一般由一臺可以連續(xù)輸送液體的恒流泵,、紫外檢測儀與色譜柱構(gòu)成,,其中重要的部件是價格不一,,款式多樣的色譜柱,這也是影響終制備效果的關(guān)鍵性環(huán)節(jié),。柱子有多種類型,,不僅材質(zhì)不一,填料也有很多學(xué)問,,下面簡要的說說關(guān)于柱子的一些情況:
各種規(guī)格的玻璃柱子在實(shí)驗(yàn)室里頭很容易得到,,而且價格低廉,但玻璃柱子致命的弱點(diǎn)是它能承受的壓力很小,,且非常容易破碎,。當(dāng)由于壓力太小而導(dǎo)致流動相流速很慢的時候,高位液面或加高壓空氣(或者氮?dú)?的采用是一個簡單的解決辦法,。在底下加真空,,也能在一定程度上解決這個問題。
不銹鋼柱子具有良好的耐腐蝕,、抗壓力性能,,但其價格相對很貴。如果,,只有很小的分離任務(wù)且經(jīng)費(fèi)也允許,,市面上直徑為1cm的小型制備柱就是首要選擇。
有機(jī)玻璃柱子也能抗壓力耐腐蝕,,相對不銹鋼柱子而言,,它是半透明的,可以看到液體的運(yùn)行狀態(tài),,對有色的物質(zhì)其特點(diǎn)就更為突出,。
硅膠、鍵合固定相(如C18),、離子交換樹脂,、聚酰胺、氧化鋁,、凝膠等都可以作為色譜柱的填料,。有不少文獻(xiàn)報道,對填料可以進(jìn)行一下處理提高了分離效果,,如,,對硅膠進(jìn)行的硝酸銀(或緩沖液)處理。
制備色譜的優(yōu)勢特點(diǎn)
根據(jù)制備色譜型號的不同,,特點(diǎn)會有些許的差異
1.分離過程壓力恒定,,柱床穩(wěn)定,重現(xiàn)性好
2.中壓制備,流速快,快速制備大量純品
3.流量及壓力設(shè)定可記憶,,便于實(shí)驗(yàn)操作
4.柱效高,,不拖尾,,可根據(jù)分離度過載上樣
5.排氣裝置設(shè)計,有效除去輸送液體中的氣泡
6.數(shù)顯控制流速,流速精確恒定
隨著更高的標(biāo)準(zhǔn)要求,,制備色譜的發(fā)展趨勢將會是儀器一體化,,操作自動化、耗品標(biāo)準(zhǔn)化以及滿足高通量純化要求,。如果需要進(jìn)行分離提純工作,,那么不妨選擇制備色譜系統(tǒng)。