色譜柱是高效液相色譜的重要部件所有對于它的一些小常識是需要了解的,因此我們將在下面的內(nèi)容當(dāng)中為大家介紹
高效液相色譜柱失效的原因有需要的話可以來了解一下,。
色譜柱裝填不良
裝填不良的色譜柱,,在短時(shí)間應(yīng)用后,填充床的壓縮通常使柱頭處產(chǎn)生塌陷,導(dǎo)致柱效突然降低,。色譜柱的初始評價(jià)指標(biāo),,如塔板數(shù)、不對稱因子等往往不能很好地表征色譜柱床層的穩(wěn)定性,,這種情緒只能在實(shí)際應(yīng)用中發(fā)現(xiàn),。
壓力因素
高效液相色譜柱使用過程中的驟然壓力波動、機(jī)械撞擊或溫度驟然變化都會對色譜柱床層產(chǎn)生影響,,導(dǎo)致峰形變差和柱效降低,。進(jìn)樣過程中,,進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)動太慢可引起壓力波動,,使色譜柱床產(chǎn)生裂隙,在柱切換時(shí)也存在同樣的問題,。使用填充良好的色譜柱,,在較低柱壓下操作,可大大減少由壓力波動造成的色譜柱損壞,。
篩板堵塞
色譜柱入口篩板堵塞是高效液相色譜柱常見的問題之一,,會導(dǎo)致柱壓升高、色譜峰拖尾,、塔板數(shù)降低等問題,。通常分析樣品中微粒雜質(zhì)右可能堵塞色譜柱入口,因此分析時(shí),,需要先過濾或者離心,,乳濁或渾濁樣品應(yīng)以0.25?m濾膜處理,也可用針頭過濾器過濾,。進(jìn)樣器與泵密封墊的磨損也會帶入微粒,,在進(jìn)樣閥與色譜柱之間使用0.25?m或0.45?m的在線過濾器,通??梢员苊膺@類問題,。
強(qiáng)保留樣品組分
強(qiáng)吸附性的樣品組分吸附在柱頭填料上,能嚴(yán)重地影響液高效液相色譜柱壽命,。像生物組織或體液的提取物,、天然產(chǎn)物等復(fù)雜樣品,極易造成柱頭的污染,。相對較純的樣品,,一般不會出現(xiàn)這一問題。色譜柱應(yīng)用中,,色譜峰嚴(yán)重拖尾或分裂往往是強(qiáng)保留污染物在柱頭吸附的體現(xiàn),。
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