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選擇色譜填料前先來看看這篇文章吧
色譜填料的選擇范圍很寬,，要做合適的選擇,，必須對此有一定的認(rèn)識和了解。
一,、硅膠基質(zhì)填料
1,、正相色譜
正相色譜用的固定相通常為硅膠以及其它具有極性官能團(tuán)，如胺基團(tuán)和氰基團(tuán)的鍵合相填料,。
由于硅膠表面的硅羥基或其它極性基團(tuán)極性較強(qiáng),，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中各組份的極性大小,，即極性較弱的組份zui先被沖洗出色譜柱,。
正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低，如：正己烷,、二甲烷等,。
2、反相色譜
反相色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì),，表面鍵合有極性相對較弱的官能團(tuán)的鍵合相,。反相色譜所使用的流動相極性較強(qiáng)，通常為水,、緩沖液與甲醇,、乙腈等的混合物。
樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)的組份zui先被沖洗出,，而極性弱的組份會在色譜柱上有更強(qiáng)的保留,。
二、聚合物填料
聚合物填料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸酯等,，其主要優(yōu)點(diǎn)是在pH值為1～14均可使用,。
相對于硅膠基質(zhì)的C18填料，這類填料具有更強(qiáng)的疏水性;大孔的聚合物填料對蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效,。
現(xiàn)有的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對硅膠基質(zhì)填料,，色譜柱柱效較低。
三,、其它無機(jī)填料
其它HPLC的無機(jī)填料色譜柱也已經(jīng)商品化,。由于其特殊的性質(zhì)，一般于特殊的用途,。如,，石墨化碳正逐漸成為反相色譜柱填料,。這種填料的分離不同于硅膠基質(zhì)烷基鍵合相，石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ),，不再需其它的表面改性,。
該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強(qiáng)。石墨化碳可用于分離某些幾何異構(gòu)體,，又由于在HPLC流動相中不會被溶解,，這類柱可在任何pH與溫度下使用。
氧化鋁也可用于HPLC,，氧化鋁微粒剛性強(qiáng),，可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床，其優(yōu)點(diǎn)是可在pH高達(dá)12的流動相中使用,。
但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強(qiáng),，應(yīng)用范圍受到一定的限制，所以未能廣泛應(yīng)用,。新型氧化鋯基質(zhì)色譜填料也可用于HPLC,，商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱，應(yīng)用pH范圍1～14,，溫度可達(dá)100℃,。
由于氧化鋯填料是zui近幾年才開始研究，加之面臨的實(shí)驗(yàn)難度,，其重要用途與優(yōu)勢尚在進(jìn)行中,。