使用國(guó)產(chǎn)液相色譜儀的小伙伴肯定會(huì)遇到漏氣和漏液的狀況,，流動(dòng)相是造成液相色譜各種問(wèn)題的主要源頭。國(guó)產(chǎn)液相色譜常見(jiàn)的故障一是堵,，二是漏,。今天就這兩部分別展開(kāi)討論。
 

　　為何會(huì)堵,？“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高,，直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端,，主要原因就是流動(dòng)相里有雜質(zhì),，雜質(zhì)的主要來(lái)源就是細(xì)菌。
 

　　1,、純水中的細(xì)菌污染
 

　　我們要認(rèn)識(shí)到,，一般的其實(shí)不需要額外過(guò)濾處理，直接使用沒(méi)有問(wèn)題,。即使是有些固態(tài)微粒雜質(zhì),，也能在液相流路系統(tǒng)前端的過(guò)濾頭上排除，真正容易引起問(wèn)題的,，是水中的細(xì)菌,。新制備的純水在室內(nèi)放置幾天就會(huì)長(zhǎng)菌，而這些細(xì)菌雖然肉眼不可見(jiàn),，卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙,，造成柱子很快報(bào)廢。這就是在配制流動(dòng)相時(shí)造成的細(xì)菌污染的原因,，解決它的方法很簡(jiǎn)單,，就是確保水的可靠性。
 

　　國(guó)產(chǎn)液相色譜解決辦法：
 

　　(1)理想的方式當(dāng)然是購(gòu)買(mǎi)實(shí)驗(yàn)室純水機(jī),，既方便又可靠,，質(zhì)量也放心。缺點(diǎn)就是價(jià)格不菲,。
 

　　(2)成箱購(gòu)買(mǎi)市售純凈水,，如500ml的怡寶或娃哈哈，這些水的質(zhì)量足以應(yīng)付液相色譜的要求,。先隨機(jī)抽取一瓶做一下細(xì)菌平板實(shí)驗(yàn),，待菌落數(shù)合格方可使用。這樣每次只要單獨(dú)開(kāi)一瓶即可,，也很方便,。每次成本2元左右。這里特別指出一個(gè)細(xì)節(jié)：在絕大多數(shù)書(shū)本上,，凡談到配制流動(dòng)相都會(huì)談到后一個(gè)過(guò)濾的步驟,。但是從我們長(zhǎng)期使用的實(shí)際效果來(lái)說(shuō)，只要能保證水的質(zhì)量,，這一步*可以也應(yīng)當(dāng)去除,。
 

　　水有保證，可以不過(guò)濾,？
 

　　(1)流動(dòng)相過(guò)濾在理論上有好處,，但是實(shí)際操作時(shí)由于不可能做到專(zhuān)瓶，反而容易造成的交叉污染,，對(duì)于配比復(fù)雜的流動(dòng)相影響更大,。
 

　　(2)流動(dòng)相過(guò)濾在經(jīng)濟(jì)成本上不劃算。買(mǎi)一套過(guò)濾裝置要6000多元,，且過(guò)濾器*是比較容易損壞的設(shè)備,。主要是過(guò)濾片的成本太高，一片就要幾十元,。按一般液相柱的正常使用壽命計(jì)算,，過(guò)濾片的成本會(huì)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于色譜柱的成本上升。
 

　　2,、流動(dòng)相的細(xì)菌污染
 

　　流動(dòng)相剛開(kāi)始不長(zhǎng)菌,，在使用時(shí)卻產(chǎn)生了細(xì)菌污染。這主要是在使用多元液相色譜儀時(shí)的一種不良使用習(xí)慣造成的,。舉簡(jiǎn)單的例子：50%的水流動(dòng)相,，有兩種使用方式。一種方式是在上機(jī)前就配好混合在一起,，另一種方式是在流路A放純,，流路B放純水。從單純實(shí)驗(yàn)效果來(lái)說(shuō),，后一種有明顯的優(yōu)點(diǎn)：首先是簡(jiǎn)單,，不需要實(shí)驗(yàn)者另個(gè)計(jì)算配比混合，其次就是比例準(zhǔn)確,，能得到保留時(shí)間重復(fù)性實(shí)驗(yàn)效果,。
 

　　但是,，液相色譜有一個(gè)致命的缺陷，就是純水在流動(dòng)相瓶中幾天時(shí)間就會(huì)長(zhǎng)細(xì)菌(很多情況下不僅僅用純水作流動(dòng)相,，而是用緩沖鹽溶液,，本身就是肥料，細(xì)菌長(zhǎng)得更迅速),，一旦有細(xì)菌柱子就壞得很快,。所以這種方式要求操作人員每次實(shí)驗(yàn)都要用新制備的純水，更要求在每次實(shí)驗(yàn)后把水相換掉,，換成沖洗干凈,，這一點(diǎn)在實(shí)際工作中很多人意識(shí)不強(qiáng)，就是意識(shí)到了但多次使用中總有一兩次會(huì)遺漏,，但是往往這一兩次就足以產(chǎn)生致命的影響,。因?yàn)橐合嗌V柱的堵塞是不可逆的。
 

　　所以,，寧可犧牲小小的保留時(shí)間的重復(fù)性,，也不要用純水溶液作為流動(dòng)相。從實(shí)際實(shí)驗(yàn)效果來(lái)說(shuō),，我建議用10%的水代替水溶液(以前我做過(guò)不同比例水的細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn),，在5%就基本可以抑菌，在10%及以上就可以*殺菌了),，這樣可以有效排除長(zhǎng)細(xì)菌的隱患,，既可作流動(dòng)相，也可沖柱,。就算是在配制流動(dòng)相時(shí)會(huì)計(jì)算得麻煩一些,，但是一次麻煩，終身受益,。
 

　　3,、液相色譜不適當(dāng)操作
 

　　(1)在更換零件時(shí)選擇的型號(hào)有誤，接口不是很匹配,，在擰緊的時(shí)候產(chǎn)生變形而使得管路堵塞,。
 

　　(2)樣品處理液凈化得不干凈，長(zhǎng)期會(huì)在六通閥和柱之間形阻塞不暢,。
 

　　(3)在使用用手動(dòng)六通閥時(shí),，有些人可能由于手勁小的原因，轉(zhuǎn)動(dòng)的不到位,，于是造成流路形成死堵,，壓力快速升高超過(guò)警戒值。
 

　　(4)在使用金屬管路作出廢液管時(shí)，應(yīng)當(dāng)注意廢液瓶中先放一些水,，并把廢液管的出口端結(jié)晶成塊并造成堵塞,。這種情況不常見(jiàn)，但卻的確發(fā)生過(guò),。