國產(chǎn)液相色譜應(yīng)用是用于分離植物色素,,其方法是這樣的:在一玻璃管中放入碳酸鈣,,將含有植物色素(植物葉的提取液)的石油醚倒入管中,。此時,,玻璃管的上端立即出現(xiàn)幾種顏色的混合譜帶,。然后用純石油醚沖洗,,隨著石油醚的加入,譜帶不斷地向下移動,,并逐漸分開成幾個不同顏色的譜帶,,繼續(xù)沖洗就可分別接得各種顏色的色素,并可分別進行鑒定,。色譜法也由此而得名,。
現(xiàn)在的色譜法早已不局限于色素的分離,其方法也早已得到了極大的發(fā)展,,但其分離的原理仍然是一樣的,。我們?nèi)匀唤兴V分析。
一,、色譜分離基本原理:
由以上方法可知,,在色譜法中存在兩相,一相是固定不動的,,我們把它叫做固定相,;另一相則不斷流過固定相,我們把它叫做流動相,。
國產(chǎn)液相色譜的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù),、吸附能力等親和能力的不同來進行分離的,。使用外力使含有樣品的流動相(氣體、液體)通過一固定于柱中或平板上,、與流動相互不相溶的固定相表面,。當(dāng)流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用,。
由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強弱不同,,隨著流動相的移動,,混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡,液相色譜使得各組分被固定相保留的時間不同,,從而按一定次序由固定相中先后流出,。與適當(dāng)?shù)闹髾z測方法結(jié)合,實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測,。
國產(chǎn)液相色譜操作要求:
1,、液相開機前先檢查洗針液、柱塞清洗液是否足夠,;
2,、液相開機后,首先確保柱塞清洗運行,,再執(zhí)行其它操作,。
3、開機排氣時,,有“purge”閥的儀器應(yīng)先打開“purge”閥再開泵以5ml/min的流速排氣,,關(guān)“purge”閥的時候先把流速降到 1ml/min再關(guān),切不可吧順序弄反,,否則系統(tǒng)壓力會瞬間變高,。
4、使用自動進樣器時,,建議啟用“洗針進樣”方式,,以降低樣品殘留,對于有些強殘留的物質(zhì)可以選擇降低濃度或減小進樣量,。
5,、國產(chǎn)液相色譜系統(tǒng)壓力高時考慮色譜柱堵了,如果將液相色譜換成兩通壓力依舊高,,考慮系統(tǒng)管路某部分堵了,。管路堵的情況下可以使用熱水清洗。對堵塞的通道可以用熱水清洗。