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針對(duì)液相色譜柱常見幾種問題的解決方案
液相色譜儀的液相色譜柱在使用一段時(shí)間后,，會(huì)出現(xiàn)一定的常見故障，如果不能很好的判斷并解決就會(huì)影響色譜柱的使用效果,，從而影響樣品的分析結(jié)果,。
液相色譜柱常見的幾種故障判斷及排除方法：
一、柱壓?jiǎn)栴}柱壓?jiǎn)栴}是使用液相色譜過程中需要密切注意的地方,，柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞,、柱效、分離效果及保留時(shí)間等密切相關(guān),。
1.1 壓力過高 這是液相在使用中zui常見的問題,，指的是壓力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因,。此時(shí),，我們應(yīng)該分段進(jìn)行檢查。
（1）.首先斷開真空泵的入口處,，此時(shí)PEEK管里充滿液體,，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下，如果液體不滴或緩慢滴下,，則是溶劑過濾頭堵塞,。
處理方法：用30%的硝酸浸泡半個(gè)小時(shí)，在用超純水沖洗干凈,。如果液體自由滴下,，溶劑過濾頭正常，在檢查,；
（2）.打開Purge閥,，使流動(dòng)相不經(jīng)過柱子，如果壓力沒有明顯下降,，則是過濾白頭堵塞,。
處理方法：將過濾白頭取出，用10%的異丙醇超聲半個(gè)小時(shí),。如果壓力降至100PSI （6.7 Bar）以下,，過濾白頭正常，在檢查,；
（3）.把色譜柱出口端取下,，如果壓力不下降，則是柱子堵塞,。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞,，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞,，則要用比現(xiàn)在流動(dòng)相更強(qiáng)的流動(dòng)相沖至壓力正常,。假如按上面的方法長(zhǎng)時(shí)間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上,，用流動(dòng)相沖洗柱子,。這時(shí)，如果柱壓仍不下降,，只有換柱子入口篩板,，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降,，所以盡量少用,。
1.2壓力過低壓力過低的現(xiàn)象一般是由于系統(tǒng)泄漏 處理方法：尋找各個(gè)接口處，特別是色譜柱兩端的接口,，把泄漏的地方旋緊即可,。當(dāng)然還有一個(gè)原因就是泵里進(jìn)了空氣，但此時(shí)表現(xiàn)的往往是壓力不穩(wěn),，忽高忽低,，更嚴(yán)重一點(diǎn)會(huì)導(dǎo)致泵無法吸上液體,。處理方法：打開Purge閥，用3~5ml/min的流速?zèng)_洗,，如果不行,，則要用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。
2漂移問題 主要包括基線漂移和保留時(shí)間漂移,。
2.1基線漂移 一般說來,，機(jī)器剛起動(dòng)時(shí)，基線容易漂移,，大概要半個(gè)小時(shí)的平衡時(shí)間,，如果你用了緩沖溶液或緩沖鹽，還有就是在低波長(zhǎng)下（220nm）平衡時(shí)間相對(duì)會(huì)比較長(zhǎng),，但如果你在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)基線漂移,，則你要考慮下面的原因：
1.紫外燈能量不足。解決方法：更換新的紫外燈
2.柱溫波動(dòng),。解決方法：控制好柱子和流動(dòng)相的溫度，檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對(duì)著柱溫箱,。
3.流通池被污染或有氣體,。 解決方法：用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池（斷開柱子）。如有需要,，可以用1N的硝酸（不要用鹽酸）,。
4.流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成,。解決方法：檢查流動(dòng)相的組成,，使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級(jí)的溶劑。
5,、樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)（高K’值）以饅頭峰樣被洗脫出,，從而表現(xiàn)出一個(gè)逐步升高的基線。解決方法：使用保護(hù)柱,，如有必要,，在進(jìn)樣之間。在分析過程中,，定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子,。
6、檢測(cè)器沒有設(shè)定在zui大吸收波長(zhǎng)處,。解決方法：將波長(zhǎng)調(diào)整至zui大吸收波長(zhǎng)處
7,、流動(dòng)相的PH值沒有調(diào)節(jié)好。解決方法：加適量的酸或堿調(diào)至*PH值
2.2保留時(shí)間漂移 保留時(shí)間重現(xiàn)是液相性能好壞的一個(gè)重要標(biāo)志,，同一種東西,，兩次的保留時(shí)間相差不要超過15s,，超過了半分鐘可看做保留時(shí)間漂移，就無法進(jìn)行定性,，你要考慮以下原因：
1,、溫控不當(dāng)。解決方法：調(diào)好柱溫,，檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對(duì)著柱溫箱,。
2、流動(dòng)相比例變化,。解決方法：檢查四元泵的比例閥是否有故障
3,、色譜柱沒有平衡。解決方法：在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱
4,、流速變化,。解決方法：重新設(shè)定流速
5、泵中有氣泡,。解決方法：,、從泵中除去氣泡
2.3 峰型異常問題 峰型問題是液相的主要問題，在做液相過程中,，我們就是要變換不同的條件來改善不好的峰型,，對(duì)于各種各樣的異常峰，要區(qū)別對(duì)待,，從主要問題出發(fā),，一個(gè)一個(gè)加以解決。
1,、所有峰均為寬峰,。解決方法：系統(tǒng)未達(dá)到平衡；溶解樣品的溶劑極性比流動(dòng)相差很多,；色譜柱尺寸及類型選擇不正確,；色譜柱或保護(hù)柱被污染或柱效降低；溫度變化造成的影響,。 ,、
2、所出峰比預(yù)想的小,。解決方法：樣品黏度過大,；進(jìn)樣品故障或進(jìn)樣體積誤差；檢測(cè)器設(shè)置不正確．定量環(huán)體積不正確,；檢測(cè)池污染,；檢測(cè)器燈出現(xiàn)問題。
3,、色譜圖中未出峰,。解決方法：系統(tǒng)未進(jìn)樣或樣品分解,；泵未輸液或流動(dòng)相使用不正確；檢測(cè)器設(shè)置不正確,；針對(duì)以上情況成因作相應(yīng)調(diào)整即可,。
4、 一個(gè)峰或幾個(gè)峰是負(fù)峰,。解決方法：流動(dòng)相吸收本底高,；進(jìn)樣過程中進(jìn)入空氣；樣品組分的吸收低于流動(dòng)相,。
5,、 所有峰均為負(fù)峰。解決方法：信號(hào)電纜接反或檢測(cè)器輸出極性設(shè)置顛倒,；光學(xué)裝置尚未達(dá)到平衡,。
6、出現(xiàn)雙峰或肩峰,。解決方法：進(jìn)樣量過大,；樣品濃度過高；保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞,；保護(hù)拄或色譜柱污染或失效,；柱塌陷或形成短通道。
7,、前伸峰。解決方法：進(jìn)樣量或樣品濃度高,；溶解樣品的溶劑較流動(dòng)
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