液相色譜柱采用高純硅膠為基質(zhì),鍵合Phenyl(苯基)后可提供*的選擇性,對(duì)雜環(huán)化合物和芳香類化合物有*的選擇性和好的分離效果,。

    液相色譜柱分離效果的好壞：

    一,、硅膠基質(zhì)填料

    1、正相色譜 正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica）以及其它具有極性官能團(tuán),，如胺基和氰基的鍵合相填料,。由于硅膠表面的硅羥基或其它極性基團(tuán)極性較強(qiáng)，因此,，分離的次序是依據(jù)樣品中各組分的極性大小,，即極性較弱的組份zui先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低，如正己烷,，氯仿,，二氯甲烷等。

    2,、反向色譜 反向色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì),，表面鍵合有極性相對(duì)較弱官能團(tuán)的鍵合相。反向色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng),，通常為水,、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物,。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)的組分zui先被沖洗出,，而極性較弱的組分在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。常用的反向填料有C18,、C8,、C4等。

    二,、聚合物填料

    聚合物填料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂等,，其重要優(yōu)點(diǎn)是在PH值為1-14均可使用。相對(duì)于硅膠基質(zhì)的C18填料,，這類填料具有更強(qiáng)的疏水性,；大孔的聚合物對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。現(xiàn)有的聚合特填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料,，色譜柱柱效較低,。

    三、其它無機(jī)填料

    其它HPLC的無機(jī)填料色譜柱也已經(jīng)商品化,，由于其特殊的性質(zhì),，一般于特殊的用途。如石墨化碳黑正逐漸成為反向色譜柱填料,。這種填料的分離不同于硅膠基質(zhì)烷基鍵合相,，石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ)，不再需其它的表面改性,。該柱填料一般比烷基鍵合相硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強(qiáng),。石墨化碳可用于分離某些幾何異構(gòu)體，由于在HPLC流動(dòng)相中不會(huì)被溶解,，這類柱可在任何PH與溫度下使用,。氧化鋁也可以用于HPLC。氧化鋁微粒剛性強(qiáng),，可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床,，其優(yōu)點(diǎn)是可以在PH高達(dá)12的流動(dòng)相中使用,。但由于氧化鋁與堿性化合物的作用也很強(qiáng)，應(yīng)用范圍受到一定限制,，所以未能廣泛應(yīng)用,。新型色譜氧化鋯基質(zhì)填料也可用于HPLC。商品化的只有聚全物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱,，應(yīng)用PH1-14,，溫度可達(dá)100℃。由于氧化鋯填料是zui近幾年才開始研究,，加之面臨的實(shí)驗(yàn)難度,，其重要用途與優(yōu)勢尚在進(jìn)行之中。