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血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):
(1)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中需要長(zhǎng)期保存的血清儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中,。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,,因此,,血清在凍入低溫冰箱前,預(yù)留體積空間,,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?/span>
(2)熱滅活是指56℃,,30分鐘加熱已解凍的血清。生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻,。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活,。除非,一般不建議作此熱處理,,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多,,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用,,平滑肌細(xì)胞收縮,,肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺,增強(qiáng)吞噬作用,,促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化,。
(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,,待全部溶解后再分裝,。生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,,減少沉淀的發(fā)生,。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,。
(4)一般廠商提供的血清為無菌,,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,,切勿直接過濾血清。
(5)血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量,。可用離心3000rpm,, 5分鐘去除,,也可不用處理。顯微鏡下"小黑點(diǎn)":經(jīng)過熱處理過的血清,,沉淀物的形成會(huì)顯著增多,。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染,。一般情況下,,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果懷疑血清質(zhì)量,,則應(yīng)立即停止使用,,更換另一批號(hào)的血清。
(6)切勿將血清在37℃放置太久,,否則血清會(huì)變得渾濁,,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)破會(huì)而影響血清質(zhì)量。