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siRNA,,shRNA,dsRNA,,miRNA間的區(qū)別

閱讀:3152        發(fā)布時間:2020-5-25

siRNA,,shRNA,dsRNA,,miRNA間的區(qū)別
RNA干擾(RNAi),,即用20多個核苷酸組成的短的雙鏈RNA(siRNA)代替?zhèn)鹘y(tǒng)反義核酸進行轉(zhuǎn)錄后基因沉默,已經(jīng)迅速而廣泛地應(yīng)用到基因功能,,基因表達調(diào)控機制研究等熱門領(lǐng)域,,并為基因治療開辟了新的途徑,。近兩年來,這方面的科學(xué)論文及報道爆炸性增長,,幾乎每天都有新的結(jié)果涌現(xiàn),。這些論文中,出現(xiàn)了很多與RNA干擾相關(guān)的概念,,意思很相近但并不*相同,,這里列舉了幾個常見的RNA干擾相關(guān)的名詞及其簡單的解釋:
1、  miRNA:在遺傳學(xué)中,,微RNA(microRNAs,,miRNA)是長度在21-23個核苷酸之間的單鏈RNA   pian段,調(diào)節(jié)基因的表達,。miRNA由基因編碼,,從DNA轉(zhuǎn)錄而來,但不翻譯成蛋白,。初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物(primary transcripts,,pri-miRNA)縮短其頸環(huán)結(jié)構(gòu)得到功能性的miRNA。成熟的miRNA分子與一個或geng多個mRNA分子部分互補,,其主要功能是下調(diào)基因的表達,。而microRNA這個概念di一次在2001年Science (26 October 2001)的文章中出現(xiàn)。
2,、  dsRNA:雙鏈RNA(double-stranded RNA, dsRNA)是一種有互補鏈的RNA,,與細胞中發(fā)現(xiàn)的DNA相似,dsRNA構(gòu)成了一些病毒(雙鏈RNA病毒)的基因組,。像病毒RNA或siRNA之類的雙鏈RNA能夠促發(fā)真核細胞中的RNA干擾,,引起脊椎動物中的干擾素反應(yīng)。
3,、  shRNA:小發(fā)卡或短發(fā)卡RNA(a small hairpin RNA or short hairpin RNA, shRNA)是一段具有緊密發(fā)卡環(huán)(tight hairpin turn)的RNA序列,,常被用于RNA干擾沉默靶基因的表達。利用載體把shRNA導(dǎo)入細胞,,載體中的U6 啟動子確保shRNA總是表達,;這種裝載了shRNA載體可被傳遞到子代細胞中去,從而使基因的沉默可被遺傳,。shRNA的發(fā)卡結(jié)構(gòu)可被細胞機制切割成siRNA,,然后siRNA結(jié)合到RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物上(RNA-induced silencing complex,RISC),,該復(fù)合物能夠結(jié)合到目的mRNAs并將其降解,。shRNA 是由RNA 聚合酶Ⅲ轉(zhuǎn)錄的,哺乳細胞中的shRNA產(chǎn)物有時會促使細胞產(chǎn)生干擾素反應(yīng)(細胞遇到病毒侵襲時做出的自我防衛(wèi)反應(yīng)),而miRNA中卻不會遇到這種問題(miRNA是由RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄,,與轉(zhuǎn)錄mRNA的聚合酶相同),。shRNA也被用于植物和其它系統(tǒng)中,在這些系統(tǒng)中不需要U6啟動子的驅(qū)動,。在植物中,,常用的增強表達的啟動子是CaMV35S(cauliflower mosaic virus 35S),在這種情況下,RNA聚合酶Ⅱ參與了轉(zhuǎn)錄,,起始RNA干擾,。
4、  siRNA:小或短干擾RNA(small/short interfering RNA, siRNA)是一類20-25個核苷酸長度的雙鏈RNA分子,,其主要在RNAi通路中起作用,,干擾特異基因的表達。此外siRNA在RNAi相關(guān)的通路中也起作用,,如抗病毒機制,基因組染色體結(jié)構(gòu)的塑造等,。其結(jié)構(gòu)是一段*互補的RNA雙鏈,,兩端各有兩個未互補的的堿基。

end:做一下小結(jié),,miRNA,,siRNA,dsRNA和shRNA都是RNA干擾技術(shù)中用到的小分子RNA,,其不同之處在miRNA 是單鏈RNA,,其余均為雙鏈RNA;siRNA和dsRNA相似,;shRNA需通過載體導(dǎo)入細胞后,,然后利用細胞內(nèi)的酶切機制得到siRNA而終發(fā)揮RNA干擾作用。

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