日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

| 注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

行業(yè)產(chǎn)品

當(dāng)前位置:
上海滬崢生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>用于RNAi的慢病毒包裝簡(jiǎn)要程序

用于RNAi的慢病毒包裝簡(jiǎn)要程序

閱讀:3227        發(fā)布時(shí)間:2020-3-18

慢病毒包裝簡(jiǎn)要程序:
以六孔板中的1孔為例,,每個(gè)樣品需要1×10∧6個(gè)293FT細(xì)胞。
1,、取1.5ml滅菌EP管,加入1.5μg包裝混合質(zhì)粒和0.5μg表達(dá)質(zhì)粒以及250μl的無血清Opti MEM,。輕柔混勻,,室溫孵育5min。
2,、取1.5ml滅菌EP管,,取9μl 脂質(zhì)體2000l溶于250μl無血清Opti-MEM I培養(yǎng)基中。輕柔混勻,,室溫孵育5min,。
3、將DNA溶液和脂質(zhì)體溶液輕柔混勻,。室溫孵育20min
4,、用胰酶消化并記數(shù)293FT細(xì)胞。用含血清的DMEM培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。
5,、在六孔板中每孔,加入1ml含血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基,,再加入DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物,。
6、將1ml重懸的293FT細(xì)胞(1×10∧6個(gè)細(xì)胞/ml)加入到平板中,。37℃CO2孵箱中孵育過夜,。
7、移除含有DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物的培養(yǎng)基移除,,代之以DMEM(含丙酮酸鈉和非必須氨基酸),。
7,、轉(zhuǎn)染后48-72h收獲含病毒的上清。3000 rpm 離心20min,,去除沉淀,。
8、病毒上清-80°C貯存,。
包裝出來的慢病毒對(duì)NIH/3T3細(xì)胞達(dá)90%以上感染效率

收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
二維碼 意見反饋
在線留言