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ELISA試劑盒常見問題處理
出現(xiàn)問題 | 出現(xiàn)問題的原因 | 解決辦法 | |
曲線 | | 試劑盒未回溫 | 試劑盒回溫到25℃ |
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| 溫度控制不好 | 控制正確溫度 |
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| 孵育時間不準確 | 控制孵育時間 |
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| 洗滌時沖擊力太大,、浸泡時間過長,、洗滌次數(shù)增加 | 洗滌4-5次，每孔250ul,，然后拍干 |
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| 陽光直射,，對著風直接吹 | 避風避光 |
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| 酶標儀的波長錯誤 | 酶標儀的波長450nm |
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| 抗體的稀釋錯誤 | 正確的稀釋抗體 |
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| 水質問題 | 用礦泉水代替 |
| | 洗滌液配制錯誤 | 正確的配制洗滌液 |
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| 少加液體（抗體,、酶標記物,、A液,、B液） | 正確的步驟加液體 |
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| 錯加液體 |
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| | 標準品也污染 | 換標準品點板 |
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| OD值不正常 | 控制溫度時間在做一次 |
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| 人為點板 | / |
| 線 性 不 好 | OD值不正常 | 控制溫度時間在做一次 |
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| 人為點板 | / |
回 收 率 | | 樣本本身就是陽性樣本 | 換陰性樣本做回收率 |
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| 空白管在實驗中被污染 | 實驗中防止交叉污染 |
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| 水質原因 | 用娃哈哈礦泉水代替 |
| | 添加量不準確 | 的添加量 |
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| 添加濃度不適合 | 添加合適的濃度 |
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| 取液吹干量多 | 準確的取液吹干 |
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| 取到其它相層液體 | 取需用相吹干 |
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| 復溶液未稀釋或加入量少 | 正確的稀釋復溶液 |
| | 添加量不準確 | 的添加量 |
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| 添加濃度不適合 | 添加合適的濃度 |
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| 取液吹干量少 | 準確的取液吹干 |
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| 復溶液稀釋錯誤或加入量多 | 正確的稀釋復溶液 |
| 水質原因 | 點復溶液驗證 | 用娃哈哈礦泉水代替 |
| 實驗操作原因 | 吸取到其它相吹干 | 準確的取液吹干 |
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| 離心不* | 延長離心時間 |
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| 樣本的污染 | 更換樣本 |
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| 乳化未處理* | 溫?。?0℃）處理乳化現(xiàn)象 |
| 儀器試劑原因 | 離心管未清洗干凈 | 正確的洗滌器具 |
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| 有機溶劑的影響 | 做試劑空白看影響結果 |
| 衍生化試劑原因（長時間衍生化試劑變質） | 更換衍生化試劑 | |
| 與曲線好壞相關 | 保證曲線的正常 | |
| 尿液pH偏堿性 | 用0.01M HCl調節(jié)尿液pH值到7.0左右,。 | |
| 尿樣滴加過多 | 重新測定,，尿樣按照說明書,，控制在2滴 | |
| 尿液過于混濁 | 將尿液離心后,，取上清液重新測定 | |
| 檢測卡由于高溫,、受潮等原因失效 | 尿樣需要重新檢測。 | |
| 過了有效期失效,。 | 該批號的金標應丟棄處理,，尿液需要重新檢測 | |
| 操作過程中檢測卡沒有平放，導致液體樣品直接沖過檢測區(qū) | 尿樣需要重新檢測,，且檢測卡平放于桌面上再加樣,。 | |
| 尿液樣品中含有較高的抑制或者干擾抗原抗體反應的物質（比如明礬、小蘇打,、氧化劑,、肌酐等） | 該尿液的檢測結果無效 | |
金標卡上在除了T和C線之外的其他地方出線 | 金標卡上的劃痕；膠體金在跑板過程中沒有*跑干凈而在卡上的痕跡,； | 該檢測卡結果不可信,，尿液需要重新檢測。 | |
實驗重復性不好 | 操作人員的不一致,，取樣的不一致,，樣本數(shù)量的多少，加樣時間的長短,，洗滌條件不一致,，加樣量不一致 | 盡量保持的實驗一致性 | |
分析軟件的使用 | 不能設置和保存 | 正確的設置和保存 | |
| 如何判斷曲線的好壞和分析結果 | 正確的判斷曲線的好壞和分析結果 | |