產(chǎn)品簡介：

　 ChIP-Seq整合了染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP）和高通量測序的技術(shù)優(yōu)勢，較ChIP-chip具有更大的開放性和精確性，可實(shí)現(xiàn)對任意物種的轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白全基因組范圍內(nèi)DNA結(jié)合位點(diǎn),，為全面解析基因調(diào)控提供了新的支撐技術(shù)。ChIP-Seq首先利用抗體特異性地富集蛋白-DNA復(fù)合體,，然后純化DNA片段,，并經(jīng)末端修復(fù)、加A和加測序接頭后,，再經(jīng)低循環(huán)數(shù)的PCR擴(kuò)增和瓊脂糖凝膠電泳回收特定大小片段,，完成測序文庫制備的工作。構(gòu)建好的文庫經(jīng)cBot擴(kuò)增,，用Illumina GAIIx進(jìn)行測序,，并通過生物信息學(xué)分析，鑒定出目的蛋白與基因組DNA結(jié)合的位點(diǎn),。

產(chǎn)品名稱：Illumina chip-seq文庫制備試劑盒48樣本

產(chǎn)品貨號：IP-202-1012 

產(chǎn)品特點(diǎn)：

產(chǎn)品優(yōu)勢：

精確性高：基因組結(jié)合位點(diǎn)定位精確性可達(dá)±50bp,。

可靠性高：比ChIP-Chip具有更低的背景，無交叉雜交非特異性,。

檢測動力學(xué)范圍廣：定量檢測不同結(jié)合強(qiáng)度轉(zhuǎn)錄因子/組蛋白的結(jié)合特異性,。

全面的分析：可在全基因組范圍內(nèi)鑒定結(jié)合位點(diǎn)，無需候選序列信息,。

更經(jīng)濟(jì)的分析：花費(fèi)只有全基因組ChIP-Chip的1/30～1/10,。

更低的起始樣品量：僅需低至10～50ng的免疫沉淀DNA

技術(shù)參數(shù)：

樣本要求：

細(xì)胞樣品：單次樣品制備需大于2×107細(xì)胞。1%甲醛固定細(xì)胞后,，PBS清洗細(xì)胞3次,，離心收集細(xì)胞沉淀，液氮速凍,，-80℃保存,，干冰運(yùn)輸。

ChIP DNA樣品：樣品量大于50ng,，樣品濃度不低于10ng/μl,，OD260/OD280為1.8～2.0。DNA片段大小在100～500bp之間,，主帶明顯,。樣品最好進(jìn)行過ChIP-PCR驗(yàn)證,。樣品溶于超純水中，放于DNase-free的不黏管中,，管口用封口膜封好,，干冰運(yùn)輸。

相關(guān)知識：

Illumina二代測序技術(shù),，邊合成邊測序（SBS）,，是廣泛采用的新一代測序（NGS）技術(shù)，負(fù)責(zé)產(chǎn)生世界上90％以上的測序數(shù)據(jù),。

Illumina的二代測序技術(shù)稱為邊合成邊測序(Sequencing-by-Synthesis,簡稱SBS),。SBS主要包括堿基延伸、熒光激發(fā)及信號收集,、剪切等3個步驟,。這3個步驟可以重復(fù)，循環(huán)進(jìn)行,。每循環(huán)一次測定一個堿基,。想測定多少個堿基（即讀長），就循環(huán)多少次,。測序循環(huán)次數(shù)可以在軟件里設(shè)定,。到底測序多長合適，要根據(jù)項(xiàng)目性質(zhì)和需求來決定,。大多數(shù)情況下,，SR實(shí)驗(yàn)（單端測序）測定1x50個堿基，PE實(shí)驗(yàn)（雙端測序）測定2x150個堿基,。

1 堿基延伸

Illumina測序試劑里所使用的dNTP特色，它們同時具有兩個修飾基團(tuán)：一個熒光基團(tuán),，一個可逆終止基團(tuán),。可逆終止基團(tuán)技術(shù)是Illumina二代測序的一大特色,。它與橋式PCR技術(shù)一起,，構(gòu)成了Illumina二代測序的兩大支柱，為穩(wěn)定獲得高質(zhì)量的測序數(shù)據(jù)打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ),。

2 信號采集

HiSeq系列測序儀具有紅綠兩根激光管,，兩個濾色片。它們兩兩組合,，可以形成4種不同的激發(fā)波長,，正好分別用于激發(fā)A、G,、C,、T 4種堿基,。

Cluster上所標(biāo)記的熒光基團(tuán)在激光激發(fā)下產(chǎn)生的信號，可以用相機(jī)拍攝或者掃描的方式收集信號,。掃描技術(shù)速度比較快,，被X10系列采用。由于FC面積比較大,，而且上表面和下表面要分別拍照,，所以拍照過程相當(dāng)耗時。對于經(jīng)典的HiSeq 2000來說,，一次測序循環(huán)所產(chǎn)生的熒光信號,，需要大約40分鐘的時間才能拍照收集完畢，時間比測序反應(yīng)本身還要長,。

3 剪切

熒光信號收集完畢后,，關(guān)閉激光，用剪切劑去除測序引物的延伸產(chǎn)物上的堿基所標(biāo)記的熒光基團(tuán)和終止基團(tuán),。兩個修飾基團(tuán)均被切除,，一方面消去干擾熒光，一方面使鏈末端的堿基回復(fù)到自然的可延伸狀態(tài),，為下一輪測序做好準(zhǔn)備,。

再重復(fù)合成、激發(fā),、收集等步驟,，即可進(jìn)行第二個堿基的測序。

產(chǎn)品訂購信息  

品牌               貨號                         名稱                            規(guī)格

Illumina   IP-202-1012   TruSeq ChIP文庫制備試劑盒     12 indexes, 48 Rxns

Illumina   IP-202-1024   TruSeq ChIP文庫制備試劑盒     12 indexes, 48 Rxns

產(chǎn)品名稱：Illumina chip-seq文庫制備試劑盒48樣本

產(chǎn)品貨號：IP-202-1012

關(guān)于公司：

Illumina的目標(biāo)是應(yīng)用創(chuàng)新技術(shù)來分析遺傳變異和功能,，實(shí)現(xiàn)幾年前甚至還無法想象的研究,。我們的任務(wù)是提供創(chuàng)新、靈活,、可擴(kuò)展的解決方案以滿足客戶的需求,。作為一家重視合作互動、快速交付解決方案和提供高質(zhì)量水平的全球性公司,，我們努力應(yīng)對這一挑戰(zhàn),。Illumina創(chuàng)新的測序和芯片技術(shù)正在推動生命科學(xué)研究、轉(zhuǎn)化和消費(fèi)者基因組學(xué)以及分子診斷中的進(jìn)展,。

紅榮微再——助理分子診斷新未來

紅榮微再作為RNA,、NGS、ctDNA,、qPCR的分子診斷專業(yè)供應(yīng)商,，以“傳遞科學(xué)價值，服務(wù)科學(xué)研究"為宗旨,努力為客戶提供質(zhì)量可靠、貨美價優(yōu)的分子診斷試劑耗材,，與客戶攜手為中國分子診斷的發(fā)展而前行,。