產(chǎn)品介紹：

　內(nèi)毒素是質(zhì)粒提取中常見的污染物,，由于真核細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素非常敏感,，因此，如果質(zhì)粒中含有內(nèi)毒素會(huì)大大降低真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。本試劑盒提供一種簡(jiǎn)單、快捷、高效提取無內(nèi)毒素質(zhì)粒的新方法,，提取的質(zhì)粒最大限度去除內(nèi)毒素，并能有效去除基因組DNA,、RNA,、蛋白等污染。

　　本試劑盒適合提取5-15ml菌液,，在堿裂解法裂解細(xì)胞的基礎(chǔ)上通過新型硅基質(zhì)膜高效專一的結(jié)合質(zhì)粒DNA,，每個(gè)吸附柱最高可吸附100 μg的質(zhì)粒DNA，同時(shí)采用特殊的緩沖液系統(tǒng)和除內(nèi)毒素過濾柱,，有效去除內(nèi)毒素,、蛋白等雜質(zhì)。由本試劑盒所得質(zhì)粒純度高,、質(zhì)量穩(wěn)定,，特別適用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染，同時(shí)也可用于DNA測(cè)序,，PCR,，基于PCR的突變，體外轉(zhuǎn)錄,，轉(zhuǎn)化細(xì)菌,，內(nèi)切酶消化等下游實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品名稱：康為世紀(jì) 無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：CW2105S

額外試劑要求：

無水乙醇,，異丙醇,。

產(chǎn)品組分：

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

1．所有組分可在干燥、室溫（15-30℃）環(huán)境穩(wěn)定保存1年,，更長(zhǎng)時(shí)間保存可置于2-8℃,，加入RNase A的Buffer P1 置于2-8℃可穩(wěn)定保存6個(gè)月,。

2．第一次使用前,，將RNase A溶液全部加入到Buffer P1中，混勻,，置于2–8℃保存,，使用前需在室溫中放置一段時(shí)間,，恢復(fù)至室溫后使用。

3．第一次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在Buffer PW中加入無水乙醇,。

4．使用前請(qǐng)先檢查Buffer P2 和Buffer E3是否出現(xiàn)結(jié)晶或沉淀,，如有結(jié)晶或沉淀現(xiàn)象，可在37℃水浴幾分鐘,，即可恢復(fù)澄清,。

5．注意不要直接接觸Buffer P2和Buffer E3，使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子,。

6．提取質(zhì)粒的量和純度與細(xì)菌培養(yǎng)濃度,、菌株種類、質(zhì)粒大小,、質(zhì)?？截悢?shù)等因素有關(guān)。

使用說明：

1．取5-15 ml過夜培養(yǎng)的菌液,，加入離心管（自備）中,，13,000 rpm（~16,200×g）離心1分鐘收集細(xì)菌，盡量吸棄全部上清,。

2．向留有菌體沉淀的離心管中加入500 μl Buffer P1（請(qǐng)先檢查是否已加入RNase A）,，使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻，懸浮細(xì)菌沉淀,。

3．向離心管中加入500 μl Buffer P2,，溫和地上下顛倒混勻8-10次，使菌體充分裂解,，室溫放置3-5分鐘,。此時(shí)溶液應(yīng)變得清亮粘稠。

4．向離心管中加入500 μl Buffer E3,，立即上下顛倒混勻8-10次,，此時(shí)出現(xiàn)白色絮狀沉淀，室溫放置5分鐘,。13,000 rpm離心5分鐘,，吸取上清，將上清加入過濾柱（Endo-RemoverFM）中（已裝入收集管）,，13,000 rpm離心1分鐘過濾,，將收集管中的濾液轉(zhuǎn)移到離心管（自備）中。

5．向?yàn)V液中加入450 μl異丙醇,，上下顛倒混勻,。

6．柱平衡：向已裝入收集管的吸附柱（Spin Columns DL）中加入200 μl Buffer PS，13,000 rpm離心2分鐘,，倒掉收集管中的廢液,，將吸附柱重新放回收集管中,。

7．將步驟5中濾液與異丙醇的混合溶液轉(zhuǎn)移到平衡好的吸附柱（已裝入收集管）中。

8．13,000 rpm離心1分鐘,，倒掉收集管中的廢液,，將吸附柱重新放回收集管中。

9．向吸附柱中加入750 μl Buffer PW（請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇）,，13,000 rpm離心1分鐘,，倒掉收集管中的廢液。

10.將吸附柱重新放回收集管中,，13,000 rpm離心1分鐘,。

11.將吸附柱置于一個(gè)新的離心管（自備）中，向吸附膜的中間部位加入100-200 μl Endo-Free Buffer EB,，室溫放置2-5分鐘,，13,000rpm離心2分鐘。-20℃保存質(zhì)粒,。

保存條件：室溫（15-30℃）

產(chǎn)品訂購信息：

品牌             貨號(hào)             名稱                                     規(guī)格

康為世紀(jì)  CW2105S  EndoFree Plasmid Midi Kit     50 preps

產(chǎn)品名稱：康為世紀(jì) 無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：CW2105S

關(guān)于公司：

康為世紀(jì)是主要從事高附加值,、高技術(shù)含量的生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn)，為生命科學(xué)研究,、基因檢測(cè)和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產(chǎn)品和服務(wù),。康為世紀(jì)建立了專業(yè)化,、集約化,、能夠形成自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的技術(shù)創(chuàng)新體系和開放式的合作創(chuàng)新平臺(tái)，構(gòu)建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系,。產(chǎn)品線主要包括分子診斷原料酶,、核酸采集與保護(hù)劑、核酸提取試劑盒,、分子診斷檢測(cè)試劑等,，打破了中國(guó)生物研究與產(chǎn)業(yè)對(duì)進(jìn)口試劑的依賴。

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紅榮微再作為RNA,、NGS,、ctDNA、qPCR的分子診斷專業(yè)供應(yīng)商,，以“傳遞科學(xué)價(jià)值,，服務(wù)科學(xué)研究"為宗旨,努力為客戶提供質(zhì)量可靠、貨美價(jià)優(yōu)的分子診斷試劑耗材,，與客戶攜手為中國(guó)分子診斷的發(fā)展而前行,。