產(chǎn)品名稱：BD Pharmingen IMag 磁珠細胞分離系統(tǒng)試劑Anti-Mouse CD90.2 Magnetic Particles - DM  (RUO)

產(chǎn)品貨號：551518

產(chǎn)品規(guī)格：

品牌

BD圖像™

克隆

30-H12英寸

替代名稱

Thy-1.2；T25,；胸腺細胞抗原1,；θ

同型

鼠婁，又名婁文,，婁/C,，婁/M IgG2b，κ

反應性

鼠標（質(zhì)量控制測試）

應用程序

細胞分離（常規(guī)檢測）

免疫原

小鼠胸腺/脾臟

Entrez基因ID

21838個

存儲緩沖區(qū)

含牛血清白蛋白且疊N化鈉≤0.09%的水緩沖溶液,。

監(jiān)管狀況

RUO

產(chǎn)品介紹：

說明

BD圖像™ 抗小鼠CD90.2（Thy-1.2）顆粒-DM是一種磁性納米顆粒,，其表面結(jié)合有單克隆抗體。使用BD-IMag對這些顆粒進行了優(yōu)化,，以陽性選擇或清除CD90.2攜帶的白細胞™ 電池分離磁鐵,。CD90.2同種抗原在大多數(shù)小鼠株的胸腺細胞、大多數(shù)外周血T淋巴細胞,、部分上皮內(nèi)T淋巴細胞（IEL,、DEC）、上皮細胞,、成纖維細胞,、神經(jīng)元、造血干細胞而非B淋巴細胞上表達,。據(jù)報道,，30-H12單抗不與小鼠Thy-1.1（如AKR/J，PL）或大鼠Thy-1發(fā)生交叉反應,。

準備和儲存

在4℃下未稀釋保存,。通過親和層析從組織培養(yǎng)上清或腹水中純化單克隆抗體。在*條件下,，將抗體或鏈霉親和素與磁性粒子結(jié)合,，去除未結(jié)合的抗體/鏈霉親和素。

產(chǎn)品通知單

所有血清蛋白來源于美國農(nóng)業(yè)部檢測的位于美國的屠宰場,。

注意：疊N化鈉在酸性條件下產(chǎn)生高毒性的疊氮酸。丟棄前,，在自來水中稀釋疊氮化合物,，以避免管道中積聚潛在爆炸性沉積物。

BD圖像™ 粒子由羧基功能化磁性粒子制備，該磁性粒子由Skold技術(shù)制造,，并獲得美國轉(zhuǎn)利號7169618的許可,。

技術(shù)協(xié)議見 。

白細胞被BD-IMag標記™ 抗小鼠CD90.2顆粒-DM按磁標記方案,。這個標記的細胞懸液隨后被放置在BD-IMag的磁場中™ 電池分離磁鐵（類別,。第552311號）。有標記的細胞移向磁鐵（正部分）,，使未標記的細胞處于懸浮狀態(tài),，這樣它們就可以被吸出（負部分）。然后將管子從磁場中取出,，使正的部分再懸浮,。將分離重復兩次以提高正餾份的純度。磁選流程圖中給出了磁選步驟,。在陽性組分被洗滌后,，小尺寸的磁性顆粒允許陽性組分在下游應用（如流式細胞術(shù)）中進一步評估。

磁標記協(xié)議

一,。根據(jù)標準實驗室程序,，從感興趣的淋巴組織制備單細胞懸液。將懸浮液通過一個70μm的尼龍濾器,，去除細胞團和/或碎片,。

2。稀釋BD-IMag™ 緩沖器（10X）（類別,。編號552362）1:10,，用無菌蒸餾水或制備1X BD IMag™ 用0.5%牛血清白蛋白、2毫米乙二胺四乙酸和0.09%疊N化鈉補充磷酸鹽緩沖液,。放在冰上,。

盡管我們的經(jīng)驗表明使用鼠標BD Fc塊™ 純化抗小鼠CD16/CD32單抗2.4G2（貓。第553141/553142號）不是*細胞分離所必需的,，一些實驗室可能希望在他們的研究中使用它,。

如果添加鼠標BD Fc塊™，繼續(xù)執(zhí)行步驟3,。如果不添加鼠標BD Fc塊™,，繼續(xù)執(zhí)行步驟4。

三,。加入0.25μg/10e6細胞的小鼠BD-Fc塊,，在冰上孵育15分鐘。

四,。用至少等體積的1X BD IMag清洗電池™ 緩沖液,，仔細吸取所有上清液,。

5個。旋轉(zhuǎn)BD IMag™ *抗小鼠CD90.2顆粒-DM,，每10e7個細胞添加50微升顆粒,。

6。充分混合,。在6℃-12℃下冷藏30分鐘,。

7。使用1X BD IMag使BD IMag粒子標記體積達到1-8 x 10e7個細胞/毫升™ 緩沖,，然后立即將試管放在電池分離磁鐵上,。室溫下孵育6-8分鐘。

8個,。將試管放在細胞分離磁鐵上,，小心地吸出上清液。這個上清液含有負的部分,。

9號,。從電池分離磁鐵上取下管子，并添加1X BD IMag™ 緩沖到與步驟7相同的卷,。輕輕地用移液管吸幾次細胞,，然后將試管放回細胞分離磁鐵上再吸2-4分鐘。

10個,。將試管放在細胞分離磁鐵上,，小心地吸出上清液并丟棄。

11號,。重復步驟9和10,。

12歲。在后的清洗步驟之后,，將陽性部分重新放入適當?shù)木彌_液中,，并以適當?shù)臐舛冗M行進一步分析。

注意：避免非特異性標記,，快速工作并遵守建議的孵育時間,。

產(chǎn)品名稱：BD品牌 磁珠細胞分離系統(tǒng) 小鼠CD90.2抗體        產(chǎn)品貨號：551518

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