產(chǎn)品名稱：Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit         

產(chǎn)品貨號：Y30021

產(chǎn)品說明：

使用CRISPR / Cas9和人類誘導的多能干細胞（hiPS）進行精確，無足跡的基因編輯的*組合,，可在產(chǎn)生疾病模型時提高復雜性,，從而促進新療法的快速發(fā)展。

我們的CRISPR / Cas9系統(tǒng)是介導哺乳動物細胞中基因組編輯的一種簡單的,，RNA可編程的方法,；它可用于在hiPS細胞中產(chǎn)生基因敲除（通過插入/刪除）或敲除（通過HDR）,。交付Cas9-sgRNA核糖核蛋白（RNP）復合物后，必須分離單個細胞并將其擴增為克隆細胞系,，以分離和篩選目標基因型,。傳統(tǒng)上，從作為集落生長和傳代的經(jīng)過編輯的hiPS細胞建立克隆種群效率低下且耗時,。通常,，它會導致細胞死亡或過早分化。為克服這一挑戰(zhàn),，我們開發(fā)了完整的系統(tǒng),，該系統(tǒng)通過有效傳遞Cas9-sgRNA RNP復合物和hiPS細胞的單細胞克隆，將無足跡的基因編輯結(jié)合在一起,。使用我們基于單層的培養(yǎng)系統(tǒng)可成功完成單細胞克隆

產(chǎn)品介紹：

人誘導多能干細胞（Human induced pluripotent stem cells,，hiPSCs)是一個功能強大的研究工具和疾病模型，因為其具備增殖,、自我更新,、分化為多種細胞類型的能力。此外,，人iPS細胞還可以再現(xiàn)細胞來源個體的疾病表型和基因型,。將人iPS細胞結(jié)合基于CRISPR/Cas9的基因編輯技術(shù)，可以在同基因的細胞系中研究特定基因改變引起的功能影響,，因為基因編輯過的人iPS細胞能提供可再生的,、無遺傳變異的患病細胞和健康細胞資源。

CRISPR/Cas9系統(tǒng)已經(jīng)成為一個強大的基因編輯工具,，因為其高的靶向特異性,，編輯效率和易用性。該技術(shù)的強大主要源于它的簡單,，因為全部只需要一個Cas9核酸酶結(jié)合一個單鏈向?qū)NA（single guide RNA,，sgRNA) 就可以決定靶向特異性（Jinek et al. 2012)。這種RNA編程的（RNA-programmable）方法利用了非同源末端連接(non-homologous end joining,，NHEJ) DNA修復途徑的易錯特性,，進而產(chǎn)生基因敲除(通過插入/刪除)。這種方法也可以通過同源重組（homology-directed repair,，HDR)途徑被用于基因敲入,。

 CRISPR/Cas9系統(tǒng)的組件可以通過多種方法成功導入至靶細胞，包括基于載體的表達系統(tǒng),，RNA轉(zhuǎn)染, 導入Cas9/sgRNA核糖核蛋白（ribonucleoprotein,，RNP)復合物(Sander and Joung 2014)等。與基于載體的方法相比，直接導入Cas9/sgRNA RNPs提供了一種快速轉(zhuǎn)入基因編輯實驗的方法,，同時脫靶效應的可能性更?。↘im et al. 2014)。

 一旦Cas9/sgRNA RNP復合物被導入,，為了分離和篩選感興趣的基因型,，單細胞必須被分離并擴增為克隆細胞系。傳統(tǒng)上,從基因編輯的hiPS細胞建立一個克隆群是低效的,、具有挑戰(zhàn)性的和耗時的,，因為hiPS 細胞是以集落生長和傳代的。通常,，這會導致細胞死亡和提前分化,。然而，Cellartis基因編輯和單細胞克隆系統(tǒng)包含一個成分確定的培養(yǎng)系統(tǒng)(由基礎培養(yǎng)基,，包被劑,，和添加劑組成)，用于有效形成單細胞克隆和擴增基因編輯后的hiPSC克隆,。DEF-CS culture system (Asplund et al. 2016)是一個基于單層培養(yǎng)的系統(tǒng),，規(guī)避了集落狀培養(yǎng)帶來的挑戰(zhàn),，允許單細胞傳代和促進接種的單細胞存活和后續(xù)擴增,。

 Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021) 是一個完整的，在無飼養(yǎng)層和成分確定條件下,，用于hiPSCs有效擴增和擴大生產(chǎn)的系統(tǒng),。試劑盒包含了從接種單細胞至96孔板到擴增至48孔板過程中所有必要的試劑。單細胞克隆擴增后,，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)繼續(xù)培養(yǎng),。

 Cellartis iPSC rCas9 Electroporation and Single-Cell Cloning System (Code No. 632643) 是一個完整的系統(tǒng)，允許通過電穿孔的方法對hiPSCs進行有效的基因編輯以及隨后的單細胞克隆形成和擴增至48孔板,。該系統(tǒng)中提供了重組Cas9蛋白質(zhì),，以及產(chǎn)生大量sgRNAs所有必要的試劑，用于電穿孔hiPSCs,。系統(tǒng)中也包括Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (前面所述) 組份,，用于進行基因編輯后的單細胞克隆形成和擴增。單細胞克隆擴增后,，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)繼續(xù)培養(yǎng),。

 Cellartis iPSC CRISPR/Cas9 Gesicle and Single-Cell Cloning System (Code No. 632642)是一個完整的系統(tǒng)，允許通過gesicle導入Cas9/sgRNA復合物進行有效的基因編輯隨后的單細胞克隆形成和擴增至48孔板,。Gesicles是一種無毒的,、高效的、替代電穿孔的方法,，不依賴昂貴的設備或耗材,。系統(tǒng)中提供所有的必要試劑用于產(chǎn)生細胞衍生的納米囊泡（稱做gesicles）,，來轉(zhuǎn)導Cas9和sgRNA至hiPSCs。系統(tǒng)中也包括Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit（前面所述）組份,，用于進行基因編輯后的單細胞克隆形成和擴增,。單細胞克隆擴增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)繼續(xù)培養(yǎng),。

 ■ 產(chǎn)品特點

·在hiPSC中進行高效的基因編輯—使用電穿孔或囊泡來遞送Cas9蛋白和sgRNA,，而沒有基因組整合并且降低脫靶效應

·優(yōu)異的單細胞存活率—編輯的hiPSC植入96孔板中的單個細胞

·編輯后和單細胞克隆期間保持多能性-hiPSC維持多能性標記Oct-4，TRA-1-60和SSEA-4的高水平（> 90％）

·穩(wěn)定的核型從頭到尾—在編輯,，單細胞克隆和擴增過程中保持正常且穩(wěn)定的核型

·靈活地按自己的方式進行基因編輯實驗-選擇完整的試劑盒,，該試劑盒可以使用基于電穿孔的（Code No. 632643）或基于囊泡的（Code No. 632642）CRISPR / Cas9技術(shù)提供編輯和單細胞克隆解決方案，或者在您自己的編輯實驗后,，利用培養(yǎng)基試劑盒（代碼Y30021）執(zhí)行有效的單細胞克隆

·在整個基因編輯/單細胞克隆實驗中繼續(xù)使用DEF-CS技術(shù)-使用Cellartis DEF-CS 500培養(yǎng)系統(tǒng)（代碼編號Y30010）在基因編輯實驗之前和之中,，然后在單細胞克隆實驗之后放大期間

產(chǎn)品名稱：CellArits授權(quán) iPSC單細胞克隆培養(yǎng)基試劑盒        產(chǎn)品貨號：Y30021

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品牌       貨號       產(chǎn)品描述                                                               包裝

CellArtis  Y30010     DEF-CS 500 Culture System,DEF-CS 500培養(yǎng)系統(tǒng),，人iPS和人ES增殖用培養(yǎng)基  1套

CellArtis  Y30021     Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit           1套

CellArtis  Y40030     GS2-M小鼠 iPS/ES干細胞無血清培養(yǎng)基                                     1套

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Cellartis品牌擁有超過15年的豐富經(jīng)驗，可為涉及干細胞的研究應用提供產(chǎn)品和服務,。該品牌源自同名公司（現(xiàn)為Takara Bio Europe AB）,，該公司由哥德堡大學的研究人員于2001年成立。從歷*看,，Cellartis品牌的主要關注點是開發(fā)和分配干細胞系,，包括用于人類或普通用途的人類胚胎干細胞（hESCs）和人類誘導的多能干細胞（hiPSC）。近,，該品牌的范圍已擴大到還包括諸如培養(yǎng)系統(tǒng),，培養(yǎng)基和試劑之類的產(chǎn)品，這些產(chǎn)品使我們的專業(yè)知識和創(chuàng)新技術(shù)更容易為生命科學研究人員所使用,。該品牌的重要里程碑涉及Cellartis DEF-CS培養(yǎng)系統(tǒng)的開發(fā)和商業(yè)化,，這是一種培養(yǎng)干細胞的革命性方法，相對于其他方法,，它具有明顯的優(yōu)勢,。

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華雅再生醫(yī)學旗艦公司：紅榮微再（上海）生物工程技術(shù)有限公司是中國中西部地區(qū)*家專業(yè)從事生物技術(shù)產(chǎn)品銷售（包括：生物試劑,、生物耗材,、儀器設備、技術(shù)產(chǎn)品等）,、干細胞儲存,、干細胞相關基礎研究、干細胞臨床應用研究及技術(shù)服務的優(yōu)良企業(yè)。供應造血干細胞培養(yǎng)基,，神經(jīng)干細胞培養(yǎng)基,，干細胞無血清培養(yǎng)基，胚胎/IPS干細胞無血清培養(yǎng)基,，心肌細胞分化培養(yǎng)基,，外周血核型分析培養(yǎng)基。公司立足西南,，面向全國,，以“積極借鑒成功經(jīng)驗，追求創(chuàng)新”為核心思想,，將為客戶提供水平的干細胞產(chǎn)品和服務,。

華雅再生醫(yī)學旗艦公司：紅榮微再（上海）生物工程技術(shù)有限公司是由我們公司的全體員工用心打造的一塊金質(zhì)招牌，我們的團隊：富有激情,、相互信任,、目標*、熱愛干細胞事業(yè),、用心為我們的干細胞客戶服務,。干細胞產(chǎn)業(yè)的蓬勃發(fā)展需要產(chǎn)業(yè)鏈中的每個成員精耕細作，協(xié)同發(fā)展,，實踐創(chuàng)新,。

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