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上海嘉鵬
主營產(chǎn)品： 超微量分光光度計(jì),核酸蛋白檢測儀,超微量紫外分光光度計(jì),nano光度計(jì),超微量核酸蛋白檢測儀 |
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2022-6-24 閱讀(1971)
那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下淺談層析實(shí)驗(yàn)中的氣泡問題（二）：
說到氣泡，你可能會(huì)聯(lián)想到酣暢淋漓的可樂,，通透上頭的啤酒,，亦或是流光飛舞的浪漫,，生活中的氣泡，似乎還帶有那么一絲美好,，然而對(duì)于實(shí)驗(yàn)來說，尤其是在大多不會(huì)配置在線脫氣單元的FPLC系統(tǒng)上做的層析實(shí)驗(yàn),，氣泡就如煩人的蒼蠅，鞋里的石子，令人如鯁在喉不吐不快,，如若是重要樣品,、昂貴填料，氣泡帶來的實(shí)驗(yàn)失敗那簡直是小型災(zāi)難現(xiàn)場,。那么氣泡是源自何來，而又去之何處,，怎么能讓它們從我們的系統(tǒng)里消失，以下此篇,，做一個(gè)小小探討,，拋磚引玉,，共謀對(duì)策而滅之,。
實(shí)際案例
Fig.1 氣泡造成的UV雜峰
Fig.2 氣泡造成的系統(tǒng)壓力波動(dòng)
這些癥狀基本能覆蓋大部分的層析實(shí)驗(yàn)問題,，可見氣泡的破壞力和惱人程度，知己知彼方才能有的放矢，那么氣泡是如何形成的呢？流動(dòng)相中氣體形成的原因有多種,，*根本的還是由于氣體在液體中達(dá)到過飽和狀態(tài),；平衡狀態(tài)時(shí)溶解空氣的量與溶液的性質(zhì),、氣體的種類有關(guān)，也與外界條件有關(guān), 主要的外界條件有以下 3 種,。
壓
力
降
低
● 層析儀的緩沖進(jìn)口一般都有濾網(wǎng)設(shè)計(jì),，如果濾網(wǎng)維護(hù)清潔不到位,，濾網(wǎng)雜質(zhì)過多或者長菌造成液體通量不足，在較高的流速情況下,，管路內(nèi)部的壓力急劇降低,，此時(shí)氣泡將會(huì)閃亮登場，帶來波浪般的圖譜波動(dòng),；因此實(shí)驗(yàn)之前需要檢查系統(tǒng)緩沖液進(jìn)口濾頭的清潔情況,，如有雜質(zhì)需立刻清洗去除。
Fig.3 緩沖液進(jìn)口濾頭篩網(wǎng)
● 配置緩沖液時(shí)的氣壓高（氣溫,，濕度,，天氣和海拔都會(huì)影響大氣壓），瓶子擰緊后保存,，如果實(shí)驗(yàn)時(shí)的氣壓有變化，在打開緩沖液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),，就會(huì)帶入析出的氣泡,，因此，預(yù)配置緩沖液的脫氣就非常重要,。
● 系統(tǒng)中的不同管徑流路的轉(zhuǎn)換,，帶來通量的改變，比如細(xì)管轉(zhuǎn)粗管,，在高流速情況下,，由于通量的驟升，形成局部負(fù)壓,，容易引發(fā)氣泡的析出或漏入,，所以系統(tǒng)管徑的使用要盡量避免細(xì)管轉(zhuǎn)粗管，如果實(shí)驗(yàn)必須,，則要注意避免使用高流速,。
● 低壓梯度時(shí),，由于低壓梯度單元部位的壓力略低于大氣壓，且混合室多裝在泵后（高壓側(cè)）,，但實(shí)際混合在低壓側(cè)就開始了,，所以，低壓梯度比混合發(fā)生在泵后的高壓梯度容易產(chǎn)生氣泡,。（常規(guī)單泵二或四通道的均為低壓混合模式）
● 色譜柱中的壓力一般較高,，氣體溶解度增大，一般在柱中不易產(chǎn)生氣泡,。然而,，在接近柱的出口處，壓力相對(duì)較低,，柱體填料的進(jìn)出口壓差會(huì)很大,，此時(shí)流動(dòng)相里溶解的氣泡由于壓力差，極易在填料中析出,，影響柱效,，甚至損壞填料，因此系統(tǒng)里會(huì)配置反壓裝置（如背壓閥）,，給柱后施加一定的反壓,，降低柱內(nèi)壓差，從而避免氣泡的析出,。
以上就是上海嘉鵬科技儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于淺談層析實(shí)驗(yàn)中的氣泡問題（二）,。
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