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上海嘉鵬
主營產(chǎn)品： 超微量分光光度計(jì),核酸蛋白檢測儀,超微量紫外分光光度計(jì),nano光度計(jì),超微量核酸蛋白檢測儀 |
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2020-1-16 閱讀(2850)
熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡不同,，它不是通過普通光源的照明觀察標(biāo)本,，而是利用定波長的光(通常是紫外光、藍(lán)紫光)激發(fā)顯微鏡下標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì),，使之發(fā)射熒光,，所以，熒光顯微鏡的光源所起的作用不是直接照明,，而是作為種激發(fā)標(biāo)本的內(nèi)熒光物質(zhì)的能源,。我們之所以能觀察標(biāo)本，不是由于光源的照明,，而是標(biāo)本內(nèi)熒光物質(zhì)吸收激發(fā)的光能后所呈現(xiàn)的熒光現(xiàn)象,。由此可知，熒光顯微鏡的特點(diǎn),，主要是它的光源能供給大量特定波長范圍的激發(fā)光,，使受檢標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)能獲得必要強(qiáng)度的激發(fā)光。同時(shí),，熒光顯微鏡必須具備相應(yīng)的濾光鏡系統(tǒng),。熒光顯微鏡是**熒光組織化學(xué)的基本工具。它是由超壓光源,、濾片系統(tǒng)(包括激發(fā)和壓制濾板),、光學(xué)系統(tǒng)和攝影系統(tǒng)等主要部件組成，是利用定波長的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光,。
1.激發(fā)熒光的方式：按光的波長范圍分為UV激發(fā)法(使用紫外線照明法)和BV激發(fā)法(使用藍(lán)紫光)兩種,。UV激發(fā)法是用短于400nm的近紫外光進(jìn)行激發(fā)。該法不存在可見的激發(fā)光,，所以被觀察的熒光呈現(xiàn)該染料固有的熒光,，容易判別標(biāo)本上的特異熒光和背景組織的自身熒光。
2.BV激發(fā)法：是以404nm,、434nm為中心的由紫外至藍(lán)光進(jìn)行激發(fā),。該方法使用藍(lán)光照射標(biāo)本，所以熒光觀察系統(tǒng)的截止濾光片必須使用可*阻斷藍(lán)光并可充分通過所需綠,、黃熒光的濾光片,。用于熒光抗體法的熒光色素。對于激發(fā)光的大吸收波長和熒光的大發(fā)光波長比較接近,，所以BV激發(fā)法使用的濾光片必須使用銳截止式濾光片,。該法可用藍(lán)光作為激發(fā)光，所以熒光色素的吸收效率較,，可得到較明亮的圖像,。其缺點(diǎn)是500nm以下的熒光無法看到,，而500nm以上的使整個(gè)圖像顯黃色。在熒光抗體法中,，大多以熒光色素*的顏色來判斷其特異性,，所以在討論微妙的特異性時(shí)，上述BV激發(fā)法的缺點(diǎn)往往影響大,。
