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色譜柱的使用壽命，除了與所分析的樣品和流動(dòng)相及使用頻率有關(guān)系外,，主要的是與日常的委會(huì)密切相關(guān),。為延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。色譜柱的使用壽命主要是分局柱效和柱壓兩個(gè)指標(biāo)來(lái)衡量,，如果支色譜柱柱效太低或柱壓太,，通常被認(rèn)為該色譜柱已經(jīng)結(jié)束。因此,，延長(zhǎng)色譜柱使用壽命的關(guān)鍵是,，消除引起柱效下降和柱壓升的因素。
以下是色譜柱的日常維護(hù)方法：、流動(dòng)相的PH應(yīng)在使用的范圍內(nèi)色譜柱除反相氰基柱PH1.5-9.0外,，其反相色譜柱的PH范圍均為1.5-10,，由于填料中存在Si-C和Si-O鍵，流動(dòng)相超過(guò)其PH范圍將會(huì)導(dǎo)致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂,，使柱效下降,，使用壽命變短。由于流動(dòng)相的PH 控制不當(dāng)而對(duì)色譜柱造成的損害,，通常很難是色譜柱恢復(fù),，因此必須認(rèn)真對(duì)待，嚴(yán)格控制流動(dòng)相的PH值,。
,、去除樣品和流動(dòng)相中的固體顆粒樣品和流動(dòng)相中含有的固體顆粒物質(zhì)會(huì)堵塞色譜柱篩板，篩板被堵住不僅會(huì)引起柱壓的升,，而且也會(huì)引起柱效下降,，因?yàn)楹Y板的堵塞會(huì)引起液流不均，導(dǎo)致色譜峰型拖尾,、變寬,，從而使柱效下降。因此,，建議使用超純水和色譜純?cè)噭?，在分析樣品前?duì)樣品進(jìn)行針筒過(guò)濾，流動(dòng)相過(guò)0.45μm濾膜,。
三,、使用保護(hù)柱或在線(xiàn)過(guò)濾器樣品和流動(dòng)相經(jīng)過(guò)濾后并不能*消除固體顆粒物質(zhì)，因?yàn)楸玫哪p,、密封圈和管路的老化也會(huì)產(chǎn)生固體顆粒物質(zhì),，這些固體顆粒被流動(dòng)相帶入色譜柱，堵塞篩板,，導(dǎo)致柱壓升,、柱效下降。保護(hù)柱和在線(xiàn)過(guò)濾器上都有篩板,，其孔徑與色譜柱孔徑相同,，因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達(dá)色譜柱，有效防止色譜柱篩板的堵塞,。由于柱壓升在分析故障中占很大比例,，因此，除對(duì)樣品和流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾外,，建議您在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線(xiàn)過(guò)濾器,。
如果色譜柱柱壓升是由于進(jìn)樣端篩板被堵引起的,，可選擇以下方式進(jìn)行補(bǔ)救： 1、先在色譜柱前加上保護(hù)柱或在線(xiàn)過(guò)濾器,，然后用甲醇,、水=20/80ml/min反向沖色譜柱180min。 2,、先在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線(xiàn)過(guò)濾器，然后反向使用,。
四,、正確使用緩沖鹽緩沖鹽通常易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑,，因此緩沖鹽使用不當(dāng)會(huì)使其析出,，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙，使填料板結(jié),，柱壓上升,；同時(shí)阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展，使色譜柱的保留能力下降,，柱效降低,。緩沖鹽析出后，去除非常困難,，因此,，正確的使用緩沖鹽對(duì)延長(zhǎng)色譜柱使用壽命非常重要。正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為句話(huà)：使用前要過(guò)濾,，使用后要沖洗。具體方法如下： 1,、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需用過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min流速?zèng)_洗60min,；使用后去除緩沖鹽的另個(gè)方法是用過(guò)渡流動(dòng)相以0.2ml/min流速?zèng)_洗色譜柱過(guò)夜。 2,、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前,，用與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min流速?zèng)_洗60min，再用該過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min沖洗色譜柱120min,。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,，以避免梯度過(guò)程中緩沖鹽析出。注意：過(guò)渡流動(dòng)相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流動(dòng)相相同,，區(qū)別只是過(guò)渡流動(dòng)相不含緩沖鹽,。 3、緩沖鹽析出的補(bǔ)救方法： 1）方案1：用甲醇/20/80以1.0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min 2）方案2：用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱過(guò)夜,。
五,、防止強(qiáng)保留物質(zhì)在色譜柱上存留強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積,，對(duì)樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為，不僅引起峰型變寬,、拖尾,，使柱效下降，同時(shí)也會(huì)引起保留時(shí)間的變化,，累積到定程度時(shí)還會(huì)導(dǎo)致柱壓升,。由于強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物對(duì)色譜分離的影響是個(gè)累積效應(yīng)，需要定的時(shí)間才會(huì)體現(xiàn)出來(lái),，但對(duì)許多藥品特別是復(fù)雜樣品而言,，很難判斷其是否是含有強(qiáng)保留物質(zhì)，因此要防止強(qiáng)保留物質(zhì)的累積,，需要在每天的日常維護(hù)中用純甲醇或乙氰清洗色譜柱,。清洗方法： 1、未使用緩沖鹽：每天分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽,，然后再用甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min。 2,、使用過(guò)緩沖鹽：分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽，然后在用純甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min 3,、補(bǔ)救方法：水——乙氰——lu仿（或異bing醇）——乙氰——水,，每步以1.0ml/min流速反向沖洗色譜柱60min。