多功能酶標(biāo)儀是實(shí)驗(yàn)室常用的一種儀器,,酶標(biāo)儀的分類方式一般可以按照濾光方式的不同和功能的不同進(jìn)行劃分。
一,、酶標(biāo)儀基于濾光方式的不同可分為濾光片式的酶標(biāo)儀和光柵式酶標(biāo)儀。
多功能酶標(biāo)儀濾光片式酶標(biāo)儀采用濾光片來(lái)進(jìn)行波長(zhǎng)的選擇,,酶標(biāo)儀內(nèi)置濾光片輪,,可選擇試驗(yàn)所需的不同波長(zhǎng)的濾光片來(lái)進(jìn)行分光,光源發(fā)出的全波譜光經(jīng)過濾光片后,,大部分被過濾,,只剩下濾光片本身允許的波長(zhǎng)通過,,這樣就可就通過濾光片來(lái)獲得特定的波長(zhǎng)。濾光片輪一般包含4-6塊濾光片,,通過選擇不同的濾光片可獲得不同的波長(zhǎng),,但是獲得的波長(zhǎng)都是固定的,受到一定的限制,,不能獲得任意所需的波長(zhǎng),而且更換濾光片價(jià)格比較昂貴,。
一般波長(zhǎng)固定的濾光片有405,,450,,490,630NM,。光柵式酶標(biāo)儀雖然才出現(xiàn)短短十年,,但是發(fā)展非常迅猛,現(xiàn)在已經(jīng)是主流的酶標(biāo)儀,。它采用光柵進(jìn)行分光,光源發(fā)出的全波譜光線經(jīng)過光柵后,,通過光柵上面分布的一系列狹縫的分光,,就可以獲得任意波長(zhǎng)的光,波長(zhǎng)連續(xù)可調(diào),,一般遞增量為1nm.光柵式酶標(biāo)儀使用方便靈活,可以通過軟件選擇任意波長(zhǎng)的光,,而且可以進(jìn)行全波長(zhǎng)的掃描,,通過全波長(zhǎng)掃描可以獲得未知樣品的吸收峰,從而可以達(dá)到檢測(cè)未知樣品的目的,,在實(shí)驗(yàn)室中很受歡迎,可以進(jìn)行更多實(shí)驗(yàn)的檢測(cè),。因此目前在國(guó)內(nèi)的普及程度很高,。
二、按照功能的劃分,,酶標(biāo)儀可以分為光吸收酶標(biāo)儀,,熒光酶標(biāo)儀,化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀和多功能的酶標(biāo)儀,。
光吸收酶標(biāo)儀是用來(lái)進(jìn)行可見光與紫外光吸光度的檢測(cè)。特定波長(zhǎng)的光通過微孔板中的樣品后,,光能量被吸收,,而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關(guān)系,由此可以用來(lái)定性和定量的檢測(cè),。光吸收的檢測(cè)技術(shù)成熟,成本低,,操作簡(jiǎn)單,,但是動(dòng)態(tài)范圍窄,靈敏度比較低,,特異性不強(qiáng)。一般可見光和紫外光分別采用鎢燈及氘燈作為光源,,而紫外/可見酶標(biāo)儀是可以將兩種光源進(jìn)行切換,,適應(yīng)不同測(cè)量波長(zhǎng)的需求。熒光酶標(biāo)儀是用來(lái)進(jìn)行熒光的檢測(cè),。通過激發(fā)光柵分光后的特定波長(zhǎng)的光照射到被熒光物質(zhì)標(biāo)定的樣品上后,會(huì)發(fā)出波長(zhǎng)更長(zhǎng)的發(fā)射光,,通過發(fā)射光柵后到達(dá)檢測(cè)器,。熒光的強(qiáng)度與樣品的濃度呈一定的比例,。熒光檢測(cè)靈敏度高,可實(shí)時(shí)檢測(cè),,使用方便,,檢測(cè)模式多樣,但是容易受外界干擾,,激發(fā)光與發(fā)射光容易互相影響,干擾檢測(cè)。
化學(xué)發(fā)光是來(lái)自生物化學(xué)反應(yīng)中的自發(fā)光,,可分為輝光型和閃光型兩種類型,。輝光型發(fā)光持久,穩(wěn)定,,能持續(xù)一段時(shí)間;閃光型發(fā)光時(shí)間短,,變化快,穩(wěn)定性不強(qiáng),,需要應(yīng)用自動(dòng)加樣器才可以進(jìn)行,。化學(xué)發(fā)光中發(fā)出的光子數(shù)與樣品量呈一定比例關(guān)系,,化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀靈敏度非常高,動(dòng)力學(xué)范圍廣,。