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ELISA規(guī)范品溶解與稀釋的正確過程
ELISA規(guī)范品溶解與稀釋的正確過程:
1. 粉末規(guī)范品時(shí)間短離心,,讓因運(yùn)送沾到管蓋、管壁的規(guī)范品沉到管底,。
2. 依據(jù)瓶標(biāo)簽參加必定體積的蒸餾水,,加水后輕柔渦旋震動(dòng),室溫靜置溶解 10-30min,,讓粉末*溶解,。
留意:加水后暫不必移液槍吹吸,防止蛋白未溶解,槍頭帶出部分蛋白,,待*溶解后可吹吸或渦旋振動(dòng)混勻,。
3. 規(guī)范品梯度稀釋:
(1)耗材預(yù)備:預(yù)備8個(gè)1.5Ml離心管,寫上S1-S7,、空白,。
(2)規(guī)范品稀釋液的挑選:
若血清、血漿,、安排勻漿樣本,,用試劑盒中的規(guī)范品稀釋液,梯度稀釋規(guī)范品,。
若細(xì)胞上清樣本,,主張用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋規(guī)范品。
(3)梯度稀釋:依據(jù)說明書,,每管參加等體積的規(guī)范品稀釋液(培養(yǎng)基),。汲取同體積溶解好的規(guī)范品到S1管中,吹打10次混勻,,渦旋5S,。從S1管中汲取同體積溶液到 S2管,吹打10次混勻,,渦旋5s,。同法稀釋S3-S7濃度。
(4)空白: 規(guī)范品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度,。
留意:梯度稀釋規(guī)范品時(shí),,渦旋震動(dòng)混勻后可時(shí)間短離心,讓到蓋子,、壁上的液體到管底,,再開始稀釋下個(gè)濃度。
規(guī)范品溶解,、梯度稀釋是ELISA試驗(yàn)要害點(diǎn),,按以上辦法梯度稀釋就可!
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