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柱式病毒RNAOUT使用手冊

時間:2017-10-16閱讀:1228
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柱式病毒RNAOUT

Column Vrial RNAOUT

產(chǎn)品及特點

本產(chǎn)品在天澤基因一管式病毒RNAOUT的基礎上開發(fā)的,、專門用于從血清(血漿)等液體樣品中提取微量病毒RNA的產(chǎn)品,,它具有下列特點:

  • 操作簡單,,整個過程只需要20分鐘左右,不需要額外在洗柱液中補加乙醇,。
  • 靈敏度高,,通過RT-PCR檢測到的zui終靈敏度可以達到50拷貝/mL。
  • 安全無毒,,不需要使用苯酚和氯等有機溶液,。
  • 如果加上病毒離心富集步驟,zui多可以處理1.5 mL液體病毒樣品,。
  • RT-PCR和熒光RT-PCR兼容。
  • 價廉物美,,性價比遠低于國外同類產(chǎn)品,。
  • 適用于各種材料,包括血清,、血漿,、腦脊液、尿液,、糞便,、培養(yǎng)細胞上清液等無細胞材料。

規(guī)格及成分

   成份

編號

大紙盒包裝

柱式病毒RNAout溶液A

71001A

30 mL

離心吸附柱(小提)

60911

50套

通用洗柱液

60408

50 mL

RNA洗脫液

71207

10 mL

使用手冊

1份

 

運輸及保存

常溫運輸,,4保存,,有效期一年。

自備試劑

使用方法

  • 在1.5 mL離心管中加入0.1-0.2 mL液體病毒樣品,。如果病毒需要富集,,可以將1.5 mL液體在4℃下24000 g冷凍離心60分鐘,,移棄1.3 mL后繼續(xù)操作,。
  • 加入0.6 mL溶液A,振蕩30秒混勻后室溫放置10分鐘,。注意:溶液 A 在 4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀,,使用前必須放在 65℃水浴使沉淀*溶解并充分搖勻后再取用。
  • 將溶液全部轉移到離心吸附柱中,,室溫放置2分鐘,。
  • 12,000-15,,000 g室溫離心1分鐘,,棄收集管中穿透液
  • 加入0.8 mL通用洗柱液到離心吸附柱中,,12,,000-15000 g室溫離心1分鐘,棄收集管中穿透液,。
  • 12,,000-15000 g室溫離心分鐘,。
  • 在離心吸附柱的濾膜的中部加入30-100 uL通用洗脫液,,然后將離心吸附柱套入一新的1.5 mL離心管中室溫放置2分鐘,。
  • 12,,000-15000 g室溫離心1分鐘,,離心管中收集的樣品即為RNA,。
  • RNA樣品可以直接用于RT-PCR或逆轉錄反應,也可-80℃長期保存,。

相關資料

常見人類疾病相關RNA病毒

病毒

簡稱

疾病名稱

類型

長度(Kb)

Measles virus

MV

measles

ssRNA

4.5~85

Hepatitis A Virus

HAV

hepatitis type A

ssRNA

7.5

Poliomyelitis virus

PV

polio

ssRNA

7.8

Rubella virus

RV

German measles

ssRNA

7.9

Hepatitis C Virus

HCV

hepatitis type C

ssRNA

9.3~9.4

Human immunodeficiency virus

HIV

AIDS

ssRNA

9.7

Dengue Virus

DV

dengue

ssRNA

11

Yellow fever virus

YFV

yellow fever .

ssRNA

11

Rabies virus

RV

rabies

ssRNA

11.9

Influenza A virus

IAV

influenza

ssRNA

13.5

Mumps virus

MuV

mumps

ssRNA

15.4

Ebola virus

EBV

virus hemorrhagic fever

ssRNA

19

 

疑難解答

Q:提取液體樣品/病毒核酸(RNA或DNA)為何很難,?

A:原因一是量少。病毒顆粒中的RNA或DNA是作為遺傳物質保存,,每個病毒zui多只攜帶幾個拷貝(而一個細胞中有上萬種RNA分子,,每種RNA有很多拷貝),同時其長度也十分有限(一般不到細胞基因組的萬分之一),,樣品中病毒數(shù)往往又不是很多,,使得樣品中病毒核酸的量往往比一個細胞中核酸的量還少,所以操作中十分容易丟失,。另外,,由于得到的核酸量很少,不能使用電泳和測OD檢測,,只能通過PCR或RT-PCR檢測,,而PCR或RT-PCR的條件又需要優(yōu)化,所以要確定提取是否成功十分不容易,。

關聯(lián)產(chǎn)品

柱式病毒DNAOUT(CAT#:70701-50)

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