產(chǎn)品及特點 | 本產(chǎn)品是在天澤基因一管式病毒RNAOUT的基礎上開發(fā)的,、專門用于從血清(血漿)等液體樣品中提取微量病毒RNA的產(chǎn)品,,它具有下列特點: - 操作簡單,,整個過程只需要20分鐘左右,不需要額外在洗柱液中補加乙醇,。
- 靈敏度高,,通過RT-PCR檢測到的zui終靈敏度可以達到50拷貝/mL。
- 安全無毒,,不需要使用苯酚和氯等有機溶液,。
- 如果加上病毒離心富集步驟,zui多可以處理1.5 mL液體病毒樣品,。
- 與RT-PCR和熒光RT-PCR兼容。
- 價廉物美,,性價比遠低于國外同類產(chǎn)品,。
- 適用于各種材料,包括血清,、血漿,、腦脊液、尿液,、糞便,、培養(yǎng)細胞上清液等無細胞材料。
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規(guī)格及成分 | 成份 | 編號 | 大紙盒包裝 | 柱式病毒RNAout溶液A | 71001A | 30 mL | 離心吸附柱(小提) | 60911 | 50套 | 通用洗柱液 | 60408 | 50 mL | RNA洗脫液 | 71207 | 10 mL | 使用手冊 | 1份 |
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運輸及保存 | 常溫運輸,,4℃保存,,有效期一年。 |
自備試劑 | 無 |
使用方法 | - 在1.5 mL離心管中加入0.1-0.2 mL液體病毒樣品,。如果病毒需要富集,,可以將1.5 mL液體在4℃下24,000 g冷凍離心60分鐘,,移棄1.3 mL后繼續(xù)操作,。
- 加入0.6 mL溶液A,振蕩30秒混勻后室溫放置10分鐘,。注意:溶液 A 在 4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀,,使用前必須放在 65℃水浴使沉淀*溶解并充分搖勻后再取用。
- 將溶液全部轉移到離心吸附柱中,,室溫放置2分鐘,。
- 12,000-15,,000 g室溫離心1分鐘,,棄收集管中穿透液。
- 加入0.8 mL通用洗柱液到離心吸附柱中,,12,,000-15,000 g室溫離心1分鐘,棄收集管中穿透液,。
- 12,,000-15,000 g室溫離心半分鐘,。
- 在離心吸附柱的濾膜的中部加入30-100 uL通用洗脫液,,然后將離心吸附柱套入一新的1.5 mL離心管中,室溫放置2分鐘,。
- 12,,000-15,000 g室溫離心1分鐘,,離心管中收集的樣品即為RNA,。
- RNA樣品可以直接用于RT-PCR或逆轉錄反應,也可放-80℃長期保存,。
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相關資料 | 常見人類疾病相關RNA病毒 病毒 | 簡稱 | 疾病名稱 | 類型 | 長度(Kb) | Measles virus | MV | measles | ssRNA | 4.5~85 | Hepatitis A Virus | HAV | hepatitis type A | ssRNA | 7.5 | Poliomyelitis virus | PV | polio | ssRNA | 7.8 | Rubella virus | RV | German measles | ssRNA | 7.9 | Hepatitis C Virus | HCV | hepatitis type C | ssRNA | 9.3~9.4 | Human immunodeficiency virus | HIV | AIDS | ssRNA | 9.7 | Dengue Virus | DV | dengue | ssRNA | 11 | Yellow fever virus | YFV | yellow fever . | ssRNA | 11 | Rabies virus | RV | rabies | ssRNA | 11.9 | Influenza A virus | IAV | influenza | ssRNA | 13.5 | Mumps virus | MuV | mumps | ssRNA | 15.4 | Ebola virus | EBV | virus hemorrhagic fever | ssRNA | 19 |
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疑難解答 | Q:提取液體樣品/病毒核酸(RNA或DNA)為何很難,? A:原因一是量少。病毒顆粒中的RNA或DNA是作為遺傳物質保存,,每個病毒zui多只攜帶幾個拷貝(而一個細胞中有上萬種RNA分子,,每種RNA有很多拷貝),同時其長度也十分有限(一般不到細胞基因組的萬分之一),,樣品中病毒數(shù)往往又不是很多,,使得樣品中病毒核酸的量往往比一個細胞中核酸的量還少,所以操作中十分容易丟失,。另外,,由于得到的核酸量很少,不能使用電泳和測OD檢測,,只能通過PCR或RT-PCR檢測,,而PCR或RT-PCR的條件又需要優(yōu)化,所以要確定提取是否成功十分不容易,。 |
關聯(lián)產(chǎn)品 | 柱式病毒DNAOUT(CAT#:70701-50) |