尿調(diào)素-慢性的有效標(biāo)志之一

尿調(diào)素（Uromodulin）是一個由UMOD基因編碼的糖蛋白,，是哺乳動物正常人體尿液中含量zui高的蛋白，主要來自哺乳動物腎臟亨氏袢,。

尿調(diào)素單體的分子量約為85kDa, 它有幾種不同的異構(gòu)體。尿調(diào)素在尿液中以聚集體的形式存在,，所以分子量可以達(dá)到幾百萬道爾頓,。當(dāng)pH低時，可析出形成凝膠,。

針對尿調(diào)素分別進(jìn)行了序列分析,、選取Glu28~Glu149進(jìn)行基因克隆和蛋白表達(dá)，獲得尿調(diào)素的重組蛋白,，,。用該蛋白作為免疫原分別免疫小鼠和兔后，獲得了單克隆抗體和多克隆抗體,，以及生物素標(biāo)記的多克隆抗體PAG918Hu71,。這些抗體可用于WB、ICC,、IHC-P,、IHC-F、ELISA等實驗中,。

利用已經(jīng)獲得的抗體,，進(jìn)行抗體配對，選取組裝成試劑盒的抗體組裝成試劑盒,。試劑盒可用來檢測不同生物樣本中UMOD的含量。

現(xiàn)在研究表明,，尿調(diào)素與妊娠,、慢性腎臟疾病等都有重要關(guān)系，不孕和流產(chǎn)的婦女尿中UrM水平顯著高于正常人,。故常見研究UMOD采用的樣本為尿液和精液,。尿液和精液的處理辦法如下：

尿液樣本的處理方法：請收集清晨*次尿液（中段尿），或24小時尿液,，2000×g離心15分鐘后收集上清,，并將標(biāo)本保存于-20oC，且應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

精漿：精液標(biāo)本收集于無菌容器中,，室溫或37oC水浴箱中液化。待精液*液化后,，將精液 4000 rpm離心10 min分離精漿,。

處理好樣本后可進(jìn)行上樣。以下是采用試劑盒測的的檢測數(shù)據(jù),，樣本包括尿液樣本和精液樣本,。請見數(shù)據(jù),。

樣本采用的是100倍稀釋，采用雙標(biāo)曲,。

檢測原始數(shù)據(jù)OD(450nm-630nm）如下：

實驗室的樣本背景不詳,，但體現(xiàn)出對于樣本良好的檢出性。同時復(fù)孔質(zhì)檢的差異小,，標(biāo)曲線性高于99%,。

實驗結(jié)果以及各方數(shù)據(jù)表明了試劑盒的高質(zhì)量。而臨床對Uromodulin許多方面的功能有待進(jìn)一步研究,，.研發(fā)的蛋白,、抗體以及Elisa試劑盒對Uromodulin的研究提供了必要的生物手段。