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細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)污染識(shí)別及處理
參考格式:
1.內(nèi)容(含圖片)來(lái)源:原創(chuàng)、非原創(chuàng)(請(qǐng)說(shuō)明具體來(lái)源)
2.細(xì)胞基本信息:名稱,、種屬來(lái)源,、凍存液、傳代數(shù),、傳代方法,、培養(yǎng)基等。
3.圖片:如污染前圖片,、處理后圖片
4.污染識(shí)別(含試劑盒檢測(cè)),、污染 處理的過(guò)程。
5.心得體會(huì),。 也歡迎各位戰(zhàn)友積極討論,、發(fā)表自己獨(dú)到的見(jiàn)解。
小黑點(diǎn):不隨細(xì)胞生長(zhǎng)而繁殖,,可能是磷酸鈣沉淀,,反之,可能是黑焦蟲(chóng),,鏡下會(huì)動(dòng),,會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)或重組細(xì)胞蛋白表達(dá)。
貼壁的黑色碎片可能是細(xì)胞裂解碎片,。
霉菌污染:貼壁培養(yǎng)有絲狀白色,,嚴(yán)重的的霉斑,絮狀,,如果在發(fā)酵罐,白色的小球,,像碾碎的泡沫塑料,。
大腸細(xì)胞絮狀結(jié)團(tuán)漂浮,培養(yǎng)液渾濁
鏈球菌:圓形,,亮點(diǎn),,三三兩兩連接
細(xì)胞中如果污染細(xì)菌,,zui常見(jiàn)的有革蘭陽(yáng)性菌,如枯草桿菌,。以及大腸桿菌,、假單孢菌等革蘭陰性菌,其中又以白色葡萄球菌較常見(jiàn),。培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后,,會(huì)很快出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,pH改變,。
也有少數(shù)培養(yǎng)液肉眼觀察無(wú)多少改變,,只能在鏡下發(fā)現(xiàn)菌體才知污染。所以,,每天應(yīng)仔細(xì)觀察,。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變,胞內(nèi)顆粒增多,、增粗,,zui后變圓脫落死亡,造成試驗(yàn)失敗和細(xì)胞株(系)丟失,。
判斷污染的方法:如果是細(xì)菌污染,,應(yīng)該很快培基就渾濁了。如果是真菌感染,,特別是初期感染,,在低倍鏡下可以看到小黑點(diǎn),特別是成團(tuán)的小黑點(diǎn),,要特別注意,。如果無(wú)法確定,就換高倍鏡,,如果是死細(xì)胞,,高倍鏡下就可以分辨,而真菌高倍鏡下仍然是小黑點(diǎn),。有些(比如支原體)污染,,鏡檢是看不到的,但是細(xì)胞的生長(zhǎng)異常,。
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