PCR實(shí)驗(yàn)室核酸檢測(cè)儀器設(shè)備相關(guān)介紹內(nèi)容由山東濟(jì)南卓隆生物自行提供,。PCR實(shí)驗(yàn)室常規(guī)分為四個(gè)區(qū)
1,試劑準(zhǔn)備區(qū)
2,,標(biāo)本制備區(qū)
3,,核酸擴(kuò)增區(qū)
4,產(chǎn)物分析區(qū)
各試驗(yàn)區(qū)必須遵循單一方向進(jìn)行,,試劑及樣品傳遞應(yīng)通過(guò)傳遞窗傳遞,。
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一.PCR擴(kuò)增液配制(試劑準(zhǔn)備區(qū)):
1.將PCR反應(yīng)液,陰性質(zhì)控品,,陽(yáng)性質(zhì)控品,,從-20℃冰箱中取出解凍后,用旋渦混勻儀混勻后,,再用離心機(jī)瞬時(shí)離心,。
2.將PCR反應(yīng)液依據(jù)試劑說(shuō)明書(shū)按照相應(yīng)比例在超凈工作臺(tái)內(nèi)配制到離心管中,用旋渦混勻儀混勻,,再用離心機(jī)瞬時(shí)離心30秒,。
3.在超凈工作臺(tái)中用移液器將PCR擴(kuò)增液分裝在八連管中,用離心機(jī)瞬時(shí)離心30秒后,,通過(guò)傳遞窗轉(zhuǎn)移至標(biāo)本制備間,。
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二.核酸提取(磁珠法):
1.從生物安全運(yùn)輸箱中取出樣本,,檢查確認(rèn)無(wú)泄漏后,,放入水浴鍋或病毒滅火箱中56℃,30分鐘滅活后移至生物安全柜中開(kāi)蓋,。
2.在生物安全柜中用移液器將樣本分別加入到96深孔板中,。
3.將96深孔板放入核酸提取儀中進(jìn)行核酸提取。
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三.PCR擴(kuò)增分析:將八連管放入離心機(jī)瞬時(shí)離心后,,分別放入熒光定量PCR儀中,,進(jìn)行擴(kuò)增分析。
注意:
1.PCR反應(yīng)液,,陰性質(zhì)控品,,陽(yáng)性質(zhì)控品反復(fù)冷凍不要超過(guò)5次。
2.純化的核酸可保存在2-8℃冷藏箱中24小時(shí),,可在-80℃低溫冰箱中長(zhǎng)期保存(建議不超過(guò)一周),。
3.廢棄耗材試劑要在高壓蒸汽滅菌器中滅菌后,方可拿出實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步處理,。
4.流程為單向進(jìn)行,,禁止雙向傳遞,。
5.PCR擴(kuò)增液配置與核酸提取可同時(shí)進(jìn)行。