導(dǎo)讀

據(jù)中國(guó)經(jīng)濟(jì)網(wǎng)近日?qǐng)?bào)道，美國(guó)FDA針對(duì)印度某藥企生產(chǎn)的眼藥水發(fā)出警告，該眼藥水可能導(dǎo)致細(xì)菌感染,，造成失明甚至死亡,。該款眼藥水是人工淚液，用于潤(rùn)滑眼球,。美國(guó)疾控中心已確認(rèn)共有55名患者感染了一種罕見(jiàn)綠膿桿菌耐藥菌株,，其中5名患者永久性失明，1名患者因血液感染死亡,。綠膿桿菌又稱(chēng)銅綠假單胞菌,，是比較常見(jiàn)的一種致病菌，常引發(fā)呼吸道,、胃腸道,、尿道等感染。專(zhuān)家認(rèn)為,，本次感染是由于眼睛可以通過(guò)淚管與鼻腔相連,，致病菌可以從眼睛進(jìn)入鼻腔，再進(jìn)入血液等其他體液或組織,，從而導(dǎo)致疾病,。使用島津MALDI-TOF微生物鑒定系統(tǒng)，可以快速鑒定綠膿桿菌,，守護(hù)明亮雙眸,。

認(rèn)識(shí)綠膿桿菌

綠膿桿菌又稱(chēng)銅綠假單胞菌( Pseudomonas aeruginosa) ，是一種革蘭陰性條件致病菌,，抗藥性較強(qiáng),，是一種重要的食源性和水源性致病菌，如蔬菜,、水果,、瓶裝水,、桶裝水中均較常見(jiàn),。同時(shí)也是醫(yī)院內(nèi)常見(jiàn)的引發(fā)慢性感染和急性感染的致病菌之一，嚴(yán)重者可引發(fā)患者肺部功能衰竭以及纖維化囊腫,。其引起的感染具有進(jìn)展快,、易耐藥、病死率高等特點(diǎn),，所以快速準(zhǔn)確的鑒定銅綠假單胞菌顯得尤為重要,。

常見(jiàn)檢測(cè)方法

目前，傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法有生化反應(yīng)法和16S rRNA序列分析法,。生化反應(yīng)法主要依靠銅綠假單胞菌的生物學(xué)特征,，通過(guò)分離培養(yǎng)結(jié)合生化檢測(cè)等方法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行鑒定，需經(jīng)過(guò)增菌、選擇性分離培養(yǎng),、鑒定等步驟,，不僅操作繁瑣、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng),、費(fèi)時(shí)費(fèi)力,，且容易延誤診斷，難以滿足快速診斷及治療的需要,。因此,，致病菌的快速鑒定仍是臨床微生物檢驗(yàn)工作者面臨的重要問(wèn)題。

MALDI-TOF質(zhì)譜法是近年來(lái)廣泛用于微生物快速鑒定的方法,，微生物都有自身獨(dú)特的蛋白組成, 因而擁有獨(dú)特的蛋白質(zhì)圖譜,。細(xì)菌蛋白主要取決于細(xì)菌自身的遺傳因素,  受培養(yǎng)基、培養(yǎng)時(shí)間以及其他培養(yǎng)條件等外部因素的影響較小,  因而具有很好的穩(wěn)定性和可重復(fù)性,。

常見(jiàn)檢測(cè)方法比較表

島津解決方案

MALDI-TOF微生物鑒定系統(tǒng)優(yōu)勢(shì)

l                      數(shù)據(jù)庫(kù)

使用島津MALDI-TOF iDPlus Assurance,、Confidence、Performance等多款儀器,，采集待測(cè)微生物的核糖體蛋白質(zhì)譜圖,，與數(shù)據(jù)庫(kù)中的標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行匹配檢索，可以快速的進(jìn)行致病菌鑒定,。數(shù)據(jù)庫(kù)中含有3400種以上微生物的標(biāo)準(zhǔn)圖譜,，涵蓋大部分常見(jiàn)細(xì)菌及真菌。同時(shí)還支持用戶自行追加新的標(biāo)準(zhǔn)譜圖,，以滿足數(shù)據(jù)庫(kù)中未收錄菌種的鑒定需要,。

自建庫(kù)流程圖（以綠膿桿菌為例）

l                      MALDI-TOF質(zhì)譜法檢測(cè)速度快

從質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集到給出鑒定結(jié)果最快只需數(shù)十秒。日常使用只需要基質(zhì),、純水及少量有機(jī)試劑,，成本低廉。使用MALDI-TOF專(zhuān)用384孔靶板,，可以單次高通量檢測(cè)384個(gè)樣品,，同時(shí)靶板可重復(fù)使用。

鑒定流程圖

微生物鑒定流程圖

綠膿桿菌鑒定案例

使用MALDI-TOF采集綠膿桿菌質(zhì)譜圖,，導(dǎo)入微生物鑒定數(shù)據(jù)庫(kù)匹配檢索,，可以快速檢測(cè)綠膿桿菌。

綠膿桿菌質(zhì)譜圖

綠膿桿菌數(shù)據(jù)庫(kù)檢索結(jié)果

結(jié)語(yǔ)

使用島津MALDI-TOF iDPlus微生物鑒定系統(tǒng)采集菌株的核糖體蛋白質(zhì)譜圖,  與數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)后,  可以快速獲得綠膿桿菌的鑒定結(jié)果,，為科研分析或臨床篩查提供依據(jù),。MALDI-TOF質(zhì)譜法快捷、準(zhǔn)確,、成本低,，將在致病菌快速鑒定與分析中,  發(fā)揮著越來(lái)越大的作用。

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