中壓制備色譜是一般由泵提供壓力,,壓力在5~20bar。中低壓色譜柱與常壓柱,、HPLC柱有比較大的不同:在使用是是封閉的,,但是可以比較方便的打開與調(diào)節(jié)長(zhǎng)度,這與中低壓色譜常常固體上樣相適應(yīng)的,。中低壓制備色譜柱的材質(zhì)主要有塑料柱,、玻璃柱、不銹鋼柱三種,。
中壓液相制備色譜的主要部件為輸液泵,、進(jìn)樣閥、檢測(cè)器,、餾分收集器等,,早期的中壓液相制備色譜,其輸液泵大流速可達(dá)156mL/min,,并配有阻尼器,,以保證液流的穩(wěn)定;進(jìn)樣器配有0.5-50mL的不同體積的定量管,;檢測(cè)器有紫外和示差折光檢測(cè)器,,流通池體積比較大,允許大流量流動(dòng)相通過而無需分流,;餾分收集器有原盤式和排式兩種,,原盤式的接收管多達(dá)80個(gè),而后者則更多,;色譜柱內(nèi)徑9-105mm,,長(zhǎng)度250-1760mm不等。
對(duì)于一般中壓制備色譜,,當(dāng)色譜柱直徑較大時(shí),,柱頭往往設(shè)計(jì)成錐形或有類似于傘狀的液流導(dǎo)向結(jié)構(gòu),使得當(dāng)大量樣品進(jìn)入到柱頭上時(shí),,能迅速地分散到整個(gè)柱橫截面上,,及時(shí)被流動(dòng)相沖走,避免了因樣品的局部過濃而引起柱超負(fù)荷和譜帶加寬,。柱子填料則采用比較耐壓的交聯(lián)改性的多糖凝膠(如Sepharose CL,,Superose等),,聚合物微球,復(fù)合材料介質(zhì)或硬質(zhì)SiO2基體的化學(xué)鍵合相等,,粒徑一般在25~40μm(zui常用的填料尺寸是15-25μm,,25-40μm或40-63μm),可采用濕法或干法裝柱,。
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