中壓制備色譜是一般由泵提供壓力,,壓力在5~20bar,。中低壓色譜柱與常壓柱、HPLC柱有比較大的不同:在使用是是封閉的,,但是可以比較方便的打開與調(diào)節(jié)長度,,這與中低壓色譜常常固體上樣相適應的。中低壓制備色譜柱的材質(zhì)主要有塑料柱,、玻璃柱,、不銹鋼柱三種。
中壓液相制備色譜的主要部件為輸液泵,、進樣閥,、檢測器、餾分收集器等,,早期的中壓液相制備色譜,,其輸液泵大流速可達156mL/min,并配有阻尼器,,以保證液流的穩(wěn)定,;進樣器配有0.5-50mL的不同體積的定量管;檢測器有紫外和示差折光檢測器,,流通池體積比較大,,允許大流量流動相通過而無需分流;餾分收集器有原盤式和排式兩種,,原盤式的接收管多達80個,,而后者則更多;色譜柱內(nèi)徑9-105mm,,長度250-1760mm不等,。
對于一般中壓制備色譜,當色譜柱直徑較大時,柱頭往往設計成錐形或有類似于傘狀的液流導向結(jié)構(gòu),,使得當大量樣品進入到柱頭上時,,能迅速地分散到整個柱橫截面上,及時被流動相沖走,,避免了因樣品的局部過濃而引起柱超負荷和譜帶加寬,。柱子填料則采用比較耐壓的交聯(lián)改性的多糖凝膠(如Sepharose CL,Superose等),,聚合物微球,,復合材料介質(zhì)或硬質(zhì)SiO2基體的化學鍵合相等,粒徑一般在25~40μm(zui常用的填料尺寸是15-25μm,,25-40μm或40-63μm),,可采用濕法或干法裝柱。
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