制備型液相色譜通常都被認為和大容量色譜柱和高流速有關(guān)聯(lián)的,。然而并不是以設(shè)備的大小和系統(tǒng)消耗的流動相的多少來決定制備液相色譜，而是依據(jù)分離目的來決定,。分析液相的目的是給一種組份進行定量和定性,。制備液相的目的是對產(chǎn)品的單體進行提取和純化。與傳統(tǒng)的純化方法（如蒸餾,、萃?。┍容^，制備液相是一種更有效的分離方法,，因此被廣泛應(yīng)用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上,。隨著合成、植化,、生化和制藥等領(lǐng)域?qū)Ω呒兌冉M份的需求不斷增加,，制備型液相色譜儀應(yīng)用的領(lǐng)域也在迅速的擴大發(fā)展。
制備型液相色譜的分離目的是從混合物中得到純物質(zhì),。為了縮短分離時間和提高分離效率,，制備型液相色譜的的進樣品量很大，導(dǎo)致色譜柱的分離負荷相應(yīng)加大,，因此必須加大色譜柱填料,，增大柱內(nèi)徑和柱長，使用的流動相相對增多,。然而,，當(dāng)色譜柱上的樣品負載加大時，往往會導(dǎo)致柱效急劇下降而得不到純產(chǎn)品,。制備型液相色譜要解決容量與柱效之間的矛盾,，對重現(xiàn)性也要考慮,。從經(jīng)濟上來說，要少用填料,，少用溶劑,，盡可能多的得到產(chǎn)品。
一,、樣品的前處理：
制備型液相色譜柱分離的樣品多,，比分析型液相色譜柱更容易受污染，樣品前處理非常必要,。
二,、TFA在緩沖液中的作用：
1、TFA起到類似離子對的作用,，一般濃度在0.05%～0.1%,。濃度過高會使溶液偏酸，長時間使用可能影響色譜柱壽命,。
2,、TFA可抑制硅膠表面的硅醇基，改善堿性化合物的峰形,。若0.1%TFA分離不好,，可加大濃度到0.2%，但用完后要及時沖洗色譜柱,。
3,、走梯度時走成基線漂移，但對制備影響不大,。
三,、降低柱壓的方法：
采用1%乙酸水溶液和甲醇二元梯度。
四,、提高檢測下限的方法：
1,、如果是等度洗脫，一定要改成單元等度,。
2,、盡量采用乙腈－水系統(tǒng)洗脫。乙腈紫外吸收小,，相同條件下噪音小,。
五、用水要求：
不含金屬離子和細菌,。
六、分析方法開發(fā)中流動相的調(diào)整原則：
1,、由強到弱：
一般先用90%的乙腈或甲醇－水或緩沖溶液進行試驗,，可很快得到分離結(jié)果,，然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機溶劑（乙腈或甲醇）的比例。
2,、三倍規(guī)則：
每減少10%的有機溶劑（乙腈或甲醇）的量,，保留因子增加約3倍，此為三倍規(guī)則,。調(diào)整時注意觀察各個峰的分離情況,。
3、粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào)：
當(dāng)分離達到一定程度時,，應(yīng)將有機溶劑（乙腈或甲醇）10%的改變量調(diào)整為5%,，并據(jù)此規(guī)則逐漸降低調(diào)整率，直至各組分的分離情況不再改變,。
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