制備型液相色譜,，按照色譜柱和樣品量的大小，可分為以下類(lèi)型：
(1)低壓液相色譜,；
(2)中壓液相色譜,；
(3)高壓液相色譜；
(4)快速色譜,。低壓,、中壓與高壓液相色譜
1、快速色譜
柱壓通常為2bar(或30psi)左右,，對(duì)于那些容易分離的簡(jiǎn)單混合物,，由于快速色譜具有操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn),，常常是實(shí)驗(yàn)室的選擇,。但快速色譜不同于一般的層析分離，這種分離沒(méi)有壓力,，而快速分離通常使用瓶裝氮?dú)饧訅?，使流?dòng)相具有一定的流速，從而縮短了分離時(shí)間,。
快速色譜使用的柱子一般是玻璃柱,，柱直徑為3～10cm.長(zhǎng)度為7～15cm?？焖偕V中使用*泛的固定相為硅膠,。采用的粒徑通常為：25～40μm，40～63μm或63～200μm的球形固定相,。其它如鍵合相,、氧化鋁、聚酰胺吸附劑也常用作快速色譜的固定相使用,。
2,、低壓色譜(LPLC)
柱壓一般低于5bar(或75psi)。
低壓色譜一般是由蠕動(dòng)泵,、進(jìn)樣閥和檢測(cè)器組成,，可以連續(xù)化,，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)的梯度淋洗和餾分收集等操作。色譜柱管一般是玻璃或聚合物材料的,，長(zhǎng)度一般為240-440mm,，內(nèi)徑為10-40mm。
對(duì)于大多數(shù)在紫外區(qū)有吸收的物質(zhì),，光學(xué)檢測(cè)器很常用,。填料一般使用軟質(zhì)的葡聚糖、瓊脂糖,、纖維素,、合成高聚物或離子交換劑，粒徑一般為40-60μm,。
3,、中壓液相色譜
柱壓在5-20bar(或75-300psi)之間，廣泛用于實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)規(guī)模的生物制品(如動(dòng)物臟器提取液,、濃縮液,、體液、植物提取液,、生物技術(shù)發(fā)酵液等,。往往需要經(jīng)過(guò)濾膜作初級(jí)凈化的處理，以提取或純化所需的產(chǎn)品,。
中壓液相制備色譜的主要部件為輸液泵,、進(jìn)樣閥、檢測(cè)器,、餾分收集器等,，比如瑞士公司的早期的中壓液相制備色譜，其輸液泵最大流速可達(dá)156mL/min,，并配有阻尼器,，以保證液流的穩(wěn)定；進(jìn)樣器配有0.5-50mL的不同體積的定量管,；檢測(cè)器有紫外和示差折光檢測(cè)器,，流通池體積比較大，允許大流量流動(dòng)相通過(guò)而無(wú)需分流,；餾分收集器有原盤(pán)式和排式兩種,，圓盤(pán)式的接收管最多達(dá)80個(gè)，而排式的則更多,；色譜柱內(nèi)徑10-105mm,，長(zhǎng)度250-1760mm不等。
對(duì)于一般中壓制備色譜,，當(dāng)色譜柱直徑較大時(shí),，柱頭往往設(shè)計(jì)成錐形或有類(lèi)似于傘狀的液流導(dǎo)向結(jié)構(gòu)，使得當(dāng)大量樣品進(jìn)入到柱頭上時(shí),，能迅速地分散到整個(gè)柱橫截面上,，及時(shí)被流動(dòng)相沖走，避免了因樣品的局部過(guò)濃而引起柱超負(fù)荷和譜帶加寬,。柱子填料則采用比較耐壓的交聯(lián)改性的多糖凝膠,，聚合物微球，復(fù)合材料介質(zhì)或硬質(zhì)SiO2基質(zhì)的化學(xué)鍵合相等,，粒徑一般在25～40μm(常用的填料尺寸是15-25μm,，25-40μm或40-63μm)，可采用濕法或干法裝柱,。
4.高壓液相色譜(HPLC)
這是指柱壓一般大于20bar(或300psi)的“高壓(或高效)液相色譜”,，通常指所用色譜柱的塔板數(shù)大于2000，一般是在2000～20000的范圍之間,。
當(dāng)需要從大量的物質(zhì)中分離純化不足1%的所需成分時(shí),，分離工作將會(huì)十分困難，往往在純化的最后階段需要使用10μm或更小顆粒的高效填料,。為獲得所需微量組分,，可采用如下分離手段：制備型分離→半制備型分離→分析型分離→產(chǎn)物。為提高每次分離獲得純品的數(shù)量,，制備型高壓液相色譜分離通常在超載情況下運(yùn)行,。
高壓液相色譜，即目前常用的高效液相色譜,。色譜柱內(nèi)填裝的是粒度范圍較窄的微小顆粒固定相(3～30μm),，為使流動(dòng)相流出，需采用較高的壓力,，同時(shí)系統(tǒng)的復(fù)雜性及成本亦增大,，但分辨率可得到較大的提高。而填裝較大顆粒的固定相時(shí),，如中壓液相色譜系統(tǒng),，裝柱較容易，柱的通透性較高(只需較低的泵壓力),，可采用更大的色譜柱和更經(jīng)濟(jì)的儀器,，由此分辨率也較低。
制備型液相色譜滿(mǎn)足從毫克級(jí)到克級(jí)樣品的純化,，適用于制備液相色譜分離方法的開(kāi)發(fā)和優(yōu)化,，既可以在摸索方法時(shí)節(jié)省樣品和溶劑，又可以獲得一定數(shù)量的純品,，高?？蒲腥藛T和企業(yè)研發(fā)人員分離純化得力助手,。
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