1,、制備型加壓液相色譜,,按照色譜柱和樣品量的大小,,分為:
(1)低壓液相色譜,;
?。?)中壓液相色譜;
?。?)高壓液相色譜,;
2、低壓色譜(LPLC)
柱壓一般低于5bar(或75psi),。
低壓色譜一般是由蠕動泵,、進樣閥和檢測器組成,可以連續(xù)化,,實現(xiàn)自動的梯度淋洗和餾分收集等操作,。色譜柱管一般是玻璃或聚合物材料的,長度一般為240-440mm,,內徑為10-40mm,。
對于大多數(shù)在紫外區(qū)有吸收的物質,光學檢測器很常用,。填料一般使用軟質的葡聚糖,、瓊脂糖、纖維素,、合成高聚物或離子交換劑,,粒徑一般為40-60μm。
3,、中壓液相色譜(MPLC)
柱壓在5-20bar(或75-300psi)之間,,廣泛用于實驗室和工業(yè)規(guī)模的生物制品(如動物臟器提取液、濃縮液,、體液,、植物提取液、生物技術發(fā)酵液等,。往往需要經(jīng)過濾膜作初級凈化的處理,,以提取或純化所需的產(chǎn)品。
4,、高壓液相色譜(HPLC)
這是指柱壓一般大于20bar(或300psi)的“高壓(或高效)液相色譜”,,通常指所用色譜柱的塔板數(shù)大于2000,一般是在2000~20000的范圍之間,。
當需要從大量的物質中分離純化不足1%的所需成分時,,分離工作將會十分困難,往往在純化的最后階段需要使用10μm或更小顆粒的高效填料,。為獲得所需微量組分,,可采用如下分離手段:制備型分離→半制備型分離→分析型分離→產(chǎn)物,。為提高每次分離獲得純品的數(shù)量,,制備型高壓液相色譜分離通常在超載情況下運行,。
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