制備色譜是指采用色譜技術(shù)制備純物質(zhì),，即分離、收集一種或多種色譜純物質(zhì),。制備色譜中的“制備”這一概念指獲得足夠量的單一化合物,，以滿足研究和其它用途,。制備色譜的出現(xiàn)，使色譜技術(shù)與經(jīng)濟(jì)利益建立了聯(lián)系,。制備量大小和成本高低是制備色譜的兩個重要指標(biāo),。其中，氣相制備色譜主要用于石油化工產(chǎn)品和揮發(fā)性天然產(chǎn)物的色譜純樣品制備,。
1,、分析色譜的目的
分析出混合物中一個（或者幾個）純物質(zhì)的含量。制備色譜的目的,，是從混合物中得到純物質(zhì),。為了加快分離的時間與提高分離的效率，制備色譜的的進(jìn)樣品量很大,，導(dǎo)致制備色譜柱子的分離負(fù)荷的相應(yīng)加大,，也就必須加大色譜柱填料，增大制備色譜的直徑和長度,，使用的相對多的流動相,。然而，當(dāng)色譜柱上樣品負(fù)載加大的時候,，往往導(dǎo)致柱效急劇下降而得不到純的產(chǎn)品,。制備色譜，要解決容量與柱子效果之間的矛盾,，對重現(xiàn)性也要考慮,。從經(jīng)濟(jì)上來說。制備色譜要爭取少用填料,，少用溶劑,，要盡可能多的得到產(chǎn)品。
2,、樣品的前處理
制備色譜柱子由于處理的樣品多,，比分析柱子更容易受污染，所以,，必要的前處理就顯得非常的必要。萃取,、過濾,、結(jié)晶、固相萃取等簡單的分離方法,，如果用得上,，而且還不是很麻煩，就要盡可能多的采用以去掉雜質(zhì),。
3,、制備色譜柱的材質(zhì)及其特點
各種規(guī)格的玻璃柱子在實驗室里頭很容易得到,，而且價格低廉，但玻璃柱子致命的弱點是它能承受的壓力很小,，且非常容易破碎,。當(dāng)由于壓力太小而導(dǎo)致流動相流速很慢的時候，高位液面或加高壓空氣（或者氮氣）的采用是一個簡單的解決辦法,。在底下加真空,，也能在一定程度上解決這個問題。
不銹鋼柱子具有良好的耐腐蝕,、抗壓力性能,，但其價格相對很貴。如果,，只有很小的分離的任務(wù)且經(jīng)費也允許,，市面上直徑為1cm的小型制備柱是選擇。對于直徑5公分及以上直徑的制備柱子,，建議選擇DAC柱子,。
有機(jī)玻璃柱子也能抗壓力耐腐蝕，相對不銹鋼柱子而言,，它是半透明的,，可以看到液體的運行狀態(tài)，對有色的物質(zhì)其特點就更為突出,。
4,、固定相的選擇
硅膠、鍵合固定相（如C18）,、離子交換樹脂,、聚酰胺、氧化鋁,、凝膠等都可以作為色譜柱的填料,。有不少文獻(xiàn)報道，對填料可以進(jìn)行一下處理提高了分離效果,，如,，對硅膠進(jìn)行的硝酸銀（或緩沖液）處理。
5,、裝柱方法的選擇
根據(jù)固定相顆粒度和柱子的尺寸,，采用不同的裝柱方法，往往裝填越好分離效果越好,。裝柱效果跟填料的顆粒度關(guān)系很大,，顆粒度的減少會導(dǎo)致裝柱的難度大。一般來說，顆粒直徑小于20－30um的固定相采用濕法裝填,。所謂“敲擊－裝填”技術(shù)適用于顆粒直徑大于25um的固定相,。濕法的目的是迫使相對稀松的固定相懸漿以高速裝入色譜柱子，從而減少空隙的形成,。然而,，當(dāng)柱直徑大于20mm，所加壓力為30－40bar時,，高壓懸漿裝填技術(shù)就變得十分復(fù)雜,。為將小顆粒固定相裝入更大得制備型色譜柱，可采用柱長壓縮技術(shù),。這種方法,，先將固定相懸漿（或偶爾是干填充物）裝入柱中加壓，利用物理方法將其壓緊,。壓緊的方法有兩種：徑向壓縮和軸向壓縮,。濕法裝柱需要一定的設(shè)備，在柱子填完后,，應(yīng)用有柱效的測量,，對柱效低的柱子應(yīng)該重填。
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